Өсімдіктерде медициналық бағыттағы белоктарды синтездеу
Автор: bokenov.didar • Апрель 16, 2020 • Реферат • 1,413 Слов (6 Страниц) • 576 Просмотры
Қазақстан Республикасы Білім және Ғылым министрлігі
Әл-Фараби атындағы Қазақ Ұлттық Университеті
Биология және биотехнология факультеті
[pic 1]
СӨЖ
Тақырыбы: Өсімдіктерде медициналық бағыттағы белоктарды синтездеу
Орындаған: Бокенов Д.
Тексерген: Шадманова Л.
Алматы 2020 жыл
Жоспар
- Кіріспе
- Негізгі бөлім
- Промотор тұрақтылығын арттыру
- Трансляция инициациясы
- Трансляция энхансерлері
- Қорытынды
- Пайдаланған әдебиеттер
Кіріспе
Гетерологиялық ақуыздарды гендік инженерлік технологиялардың көмегімен биопродуценттердегі өңдеу қазіргі уақытта ғылыми және медициналық мақсаттарда, соның ішінде өнеркәсіптік ауқымда да кеңінен қолданылады. Бұл үшін экспрессия жүйесінің кең спектрі әзірленді. Қазіргі заманғы әдістер түраралық сабақтарды жеңуге және әртүрлі таксономиялық тиістіліктегі жасушалар жасушаларында ақуыз синтезін жүзеге асыруға мүмкіндік береді. Экспрессия жүйесін құру үшін мақсатты ақуызды кодтайтын ген немесе кДНК (немесе оның негізінде оны vitro синтездеуге болатын белококококодирлеуші жиілігі туралы ақпарат), трансгеннің адекватты транскрипциясын, тиісті мРНК трансляциясын және жасушалық компартменттердің бірінде бөтен текті ақуыздың жиналуын немесе оның секрециясын қамтамасыз етуге қабілетті тиісті вектор және биологиялық жүйе (бөтен адам ағзасы–иесі) қажет.Өсімдік жүйелерін пайдалану ақуыздарды өңдеу технологиясын дамытудың перспективалық бағыты болып табылады. Олар әртүрлілігімен және иілгіштігімен ерекшеленеді, үлкен аумақтарда өсірілетін,яғни бірнеше рет масштабтауға қабілетті трансгендік өсімдіктерге дейін белгіленген көлемді және жоғары тазалықты жасушалық дақылдардан түрленеді. Өсімдіктерде сүтқоректілер үшін қауіпті патогендер және бактерияларға тән уыттар жоқ ,бұл медицинада қолданылатын рекомбинантты өнімнің контаминациясымен байланысты тәуекелдерді төмендетеді. Өсімдік клеткаларында ақуыздардың кең спектрін синтездеу мүмкін: бактериялардан, пластомдық трансформацияны пайдалана отырып, кейбір жағдайларда алынатын бактериялардан адамның күрделі мультисубъединичных гликозилденген ақуыздарына дейін. Өсімдік жүйелері ядролықайднк трансформациясы есебінен бөтен текті геннің тұрақты зерттелетін экспрессиясының, сондай-ақ қажетті ақуыздың жемістен тыс ампликондар есебінен тез жоғары тиімді өңделу мүмкіндігін береді. Өсімдік жасушаларының генетикалық трансформация әдістері жақсы өңделген және өнеркәсіптік ауқымда қолданылады.
[pic 2]
Негізгі бөлім
Ақуызды өңдеуге арналған генетикалық құрылым, ең алдымен, мақсатты геннің транскрипциясының жеткілікті деңгейін және оның мРНК тиімді көрсетілуін қамтамасыз етуі тиіс.Жеке реттеушілік тізбектелген мақсатты ген, әдетте, оның өсімдіктер қабығының экспрессиясының барабар деңгейін қамтамасыз ете алмайды. Сондықтан генетикалық құрылым құру кезінде ағза жасушаларында жұмыс істейтін реттеуші элементтерді таңдау қажет өсімдіктердегі ақуыздарды өңдеу үшін генетикалық конструкция құрылымы схемалық түрде көрсетілген.Онда әдетте мынадай элементтер бар:
- мақсатты геннің тізбегін кодтайтын;
- транскрипцияның бастамасы мен деңгейіне жауап беретін промотор;
- поли(А)РНК саласының 3' процессингіне жауап беретін сигнал.
Қойылған міндеттерге байланысты транскрипцияның тиімділігі мен тұрақтылығын күшейтетін интрон бірқатар қосымша элементтерді конструкцияға енгізуге болады:
- Жалпы немесе ерекше трансляция энхансерлері мен сигналдары бар,
- мРНК цитоплазмалық тұрақтылығын модульдейтін ретрансляцияланатын тізбектер (ҒТП);
- трансгеннің оқу рамкасымен қосылған және мақсатты белокты оқшаулауды модульдейтін немесе белкипартнерлерді және ерекше белгілерді (тэги) кодтайтын қосымша белок кодталатын учаскелер.
Транскрипцияны бақылау және мРНК.
Промотор тұрақтылығын арттыру.
Промотор мақсатты геннің мРНК транскрипциясының деңгейін және оның сыртқы жағдайларға тәуелділігін, кеңістіктік (әртүрлі тіндер мен органдар) және трансген экспрессиясының уақытша сипатын анықтайды. Қазіргі уақытта өсімдік жасушасында тиімді жұмыс істей алатын, шағын және синтетикалық, конститутивті ииндуцибельді, өсімдіктерден және патогендерінен бөлінген арнайы деректер базасы оңтайлы вариант промоторды таңдауға мүмкіндік береді.Рекомбинантты ақуыздарды өңдеу үшін ең танымал промоторлар-конститутивті промоторлар. Олардың ішінде түсті қырыққабат мозаикасы мен оның туындылары 35s рнквирус промоторын қолдану кеңінен таралған.
...