Приготування середовища Мурасіге – Скуга (МС). Стерилізація середовища автоклавуванням

ЗВІТ

про виконання лабораторної роботи

з навчальної дисципліни

 “Біотехнологія технічних рослин”

Лабораторна робота №1

Тема: Приготування середовища Мурасіге – Скуга (МС).         Стерилізація середовища автоклавуванням.

Мета: Освоїти техніку приготування поживного середовища МС з маточних розчинів та його стерилізації автоклавуванням.

Матеріали і обладнання: макро – і мікросолі, що входять до складу поживного середовища МС, Fe – хелату і вітамінів, мезоінозит, сахароза, агар, 1н HCl і 1н KOH, ваги, шпателі, магнітний змішувач, рН – метр, мірні циліндри – 500 мл, 100 мл, мірні піпетки – 5 мл, 1 мл, ватні пробки, хімічні пляшки на 250 мл.

Теоретичні відомості

1. Для зручності приготування поживних середовищ готують маточні розчини макро- та мікроелементів зважуючи і розчиняючи окремо кожну наважку в новій порції дистильованої води.

 2. Розчин фітогормонів готують таким чином:

-  ауксини: 2,4-Д, ІОК, ІМК, НОК– розчиняють 100 мг речовини в 0,5- 2 мл етанолу, підігрівають, додають води до 100 мл (концентрація 1мг/мл);

- цитокініни: Кін, Зеа, БАП – розчиняють 100 мг речовини в 2 мл 1н НСl, підігрівають, доводять водою до 100 мл;

-  гібереліни: ГК3 – розчиняють у воді;

-  абсцизини: АБК – розчиняють в 3 мл 70 % етанолу, доводять водою до потрібного об'єму.

3. Розчини вітамінів: тіамін НС1 (В1), піридоксин (В6), нікотинову кислоту (РР), аскорбінову кислоту (С), фолієву кислоту (В9), біотин (Н), параамінбензойну кислоту, Са – пантотенат, ціанкобаламін (В12), рибофлавін (В2) – розчиняють в воді (концентрація 1мг/мл, або 0,1 мг/мл).

Маточні розчини зберігають в холодильній камері при температурі +4°С. Розчини вітамінів заморожують в невеликих кількостях (3 – 5 мл).

Хід роботи