Валидация аналитической методики количественного содержания нитрофурала

Лабораторная работа

Валидация аналитической методики количественного содержания нитрофурала

Цель лабораторной работы: валидация методики определения количественного содержания нитрофурала в лекарственной форме экстемпорального изготовления фотоэлектроколориметрическим методом.

ПЛАН РАБОТЫ

1. Составить  план проведения валидации методики.

2. Провести  валидацию методики по показателям линейность и сходимость (из 6 серий лекарственной формы). Все полученные значения  занести  в таблицы 5 и 9.

3. Провести  валидацию методики по показателям внутрилабораторной прецизионности (используя данные других групп, табл. 9) и правильности (заполнить таблицы 7, 8 и 10).

4. Сделать расчеты и провести статистическую обработку результатов.

5. Оформить  отчет по валидации.

Объект: лекарственный препарат состава

Нитрофурала 0,02

Раствора натрия хлорида 0,9% − 100 мл

Методика количественного определения нитрофурала: в сухую пробирку точно отмеривают 0,5 мл лекарственной формы, 8 мл воды очищенной, перемешивают и добавляют 1,5 мл 0,1 моль/л раствора натрия  гидроксида. Содержимое пробирки вновь перемешивают и через 20 минут измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 450 ± 10 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода.

Параллельно в тех же условиях проводят измерение оптической плотности раствора, приготовленного из 0,5 мл стандартного раствора нитрофурала по указанной выше методике.

Приготовление исходного стандартного раствора фурацилина

Навеску нитрофурала 0,0200 г растворяют в 70−80 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане при 70-80 0С. После охлаждения объем доводят до метки. В 1 мл стандартного раствора содержится 0,0002 г нитрофурала. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

Рассчитывают содержание нитрофурала в лекарственной форме.

Определение валидационных параметров

Специфичность. Объяснить специфичность методики исходя из физико-химических свойств нитрофурала и других компонентов лекарственного препарата.

Линейность. Параметр линейность определяют путем измерения пяти стандартных растворов нитрофурала с возрастающей концентрацией.

Методика приготовления стандартных растворов. Используют исходный стандартный раствор (1 мл стандартного раствора содержит 0,0002 г нитрофурала). В сухие пробирки точно отмеривают 0,3, 0,4, 0,5, 0,7, 0,9 мл исходного стандартного раствора, 8,2, 8,1, 8,0, 7,8, 7,6 мл воды очищенной соответственно, перемешивают и добавляют 1,5 мл раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л). Содержимое пробирок вновь перемешивают и через 20 минут измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 450 ± 10 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода. Вносят данные в таблицу 5.

Таблица 1

Определение линейности

Градуировочный график зависимости A = f (C)

[pic 1]

Заключение: Методика является линейной.

Правильность. Для определения правильности используют метод добавок. Определение проводят трижды на трёх уровнях концентраций (80 %, 100 %, 120 %).

Для этого:

1. Готовят 3 модельных раствора, используя в качестве добавки раствор нитрофурала с концентрацией 0,0002 г/мл (табл. 6).