Шпаргалка по "Микробиологии"

1.Систематика микробов Систематика - наука о классификации, многообразии организмов, их эволюционном родстве и взаимоотношениях между микроорганизмами. Структурная единица -вид. Для определения видовой принадлежности надо изучить морфологические, цитологические, культуральные, физиологические, иммунные свойства и родство. Каждый вид имеет латинское название: родовое и видовое.

Все микроорганизмы объед в 4 царства:

1)Procariotae - безъядерные

2)Fungi(mycota) - грибы

3)Animalia (простейшие)

4)vira (вирус)

Царства состоят из отдел - секция - класс - порядок - семейство - род - вид - подвид - штамм - клон.

В составе царств Procaryote 4 отдела:

gracilicutes(тонкокожие) 8 секций, извитые грам(отрицательные)бактерии

firmicutes (крепкокожие) микобоктерии,грам+пал

tenericutes(нежнокожие) микоплазмы,риккетсии  

mendosicutes(архибактерии)

2.Характеристика палочковидных

Самая многочисленная группа прокариот. Форма-цилиндрическая ,симметрия-осевая. В переводе с латинского Bacterium – палочка. Могут располагаться по одиночке, парами(диплобактерии), цепочками (стрептобактерии). Коринобактерии-палочки с утолщением на концах (возбудитель дифтерии). Микобактерии- тонкие извилистые палочки (возбудитель туберкулеза). Фузобактерии-крупные палочки с заостренными краями (возбудитель некробактериоза). Бациллы- палочки, образующие споры. Также могут располагаться как и бактерии. Костридии – палочки, имеющие споры на концах клетки, диаметр которой превышает толщину клетки (возбудитель ботулизма, столбняка), располагаются по одиночке.

3.Разновидности кокков

Кокки – бактерии, форма-шаровидная. В зависимости от расположения клеток после деления различают: Микрококки– располагаются одиночно, парами, скоплениями. Обитают в почве, пресных водоемах. Находятся на коже человека и животных, сапрофиты. Диплококки – делятся в одной плоскости, соединяясь после деления попарно, сапрофиты и возбудитель менингококковой инфекции человека, гонореи. Стрептококки – располагаются цепочкой, встречаются одиночные и парные клетки. Форма- сферическая, овальная; сапрофиты, полезные молочнокислые бактерии (их 20 видов, разделены на 17 серогрупп, называют латинскими буквами). Стафилококки – располагаются гроздьями, парами, встречаются одиночные клетки. Форма-сферическая и овальная. Тетракокки – располагаются по четыре клетки. Сарцины – располагаются скоплениями, пакетами, сапрофиты, находятся в почве, воздухе, кишечнике человека и животных.

Наибольшее значение в патологии человека и животных имеет золотистый стафилококк – Stafilococcus aureus, вызывает у человека и животных около 120 клинических форм заболеваний. Клинически стафилококковая инфекция может проявляться заболеваниями местными (абсцессы), системными (пневмония, мастит), генерализованными (сепсиса и септицемии).

4.Характеристика извитых.

Они составляют порядок Spirochaetales. В составе порядка два семейства: Spirilliaceae и Vibrionaceae. К семейству Spirilliaceae относятся: Род спирохеты-крупные спирали с большим количество завитков, сапрофиты, обитают в грязных водоемах. Род кристиспиры -мелкие спирали, с большим количеством завитков, сожители моллюсков. Род трепонемы – мелкие с большим количеством завитков, сапрофиты и два возбудителя: Treponema pallidum – возбудитель сифилиса человека, Treponema hyodysenteria – возбудитель анаэробной дизентерии поросят. Боррелии – крупные спирали, от 3-10 неправильных завитков, два возбудителя- возбудитель возвратного тифа человека, передается с укусом вши и возбудитель боррелиоза птиц, передается с укусом персидских клещей, есть вакцина. Лептоспиры-вогнутые спирали с завитками-крючками. В составе семейства один род и два вида. Leptospira biflexa – сапрофит, обитатель водоемов со снеговой водой. Leptospira interrogans – возбудитель лептоспироза животных и человека. Род кампилобактерии - завиток в виде запятой или летящей чайки. Подвижна за счет жгутиков на концах. В составе рода много сапрофитов, два возбудителя: Campylobacter fetus-fetus – возбудитель кампилобиоза МРС, Campylobacter fetus veneralis – возбудитель кампилобактериоза КРС. Род Vibrio. В составе рода много сапрофитов – обитателей водоемов и один возбудитель– возбудитель холеры человека.

5.Характеристика грибов, микозов

Грибы - эукариотические организмы, представляют из себя ветвящиеся нити – гифы, сплетение из которых называется мицелием (субстратный, воздушный, компактный).

Относят к царству Mycota 100тыс.видов грибов.  Отделы: Mixomycota (слизевики) и Eumycota – истинные грибы. Входят классы: низшие грибы:Chrytidiomycetes, Huphochrytidiomycetes, oomycetes – сапрофиты. Zygomycetes – условнопатогенные, Высшие грибы: ascomycetes – крупные овальные клетки, дрожжеподобные. Basidomycetes – шляпочные. Denderomycetes – возбудители отравлений. Заболевания вызываемые грибами – микозы. Типы микозов: 1) поверхностные (стрегущий лишай, микроспория). 2) глубокие (шерсть, кожа, подкожная клетчатка, лимфоузлы) 3) Висцеральные (поражение внутренних органов) аспергилез. 4) микотоксикозы – отравление токсинами.  Спора- структура содержащая геном окруженной мощной оболочкой. В благоприятных условиях спора прорастает образуя гиф. Она разрастается  и образует сплетения – мицелий. Грибы образуют спорообразующие структуры. Если спора внутри гифа то спора – эндоспора, а гифы – спорангионосцы. Если споры образуются на концах ответвлений то их называют называют конидии, а структуры – конидиеносцы. Если спора содержит один геном – микрокомидии, а если много – макрокомидии. У низших споры со жгутиками – зооспоры. Грибы класса аскомицетов преимущественно представляют собой крупные овальные клетки. Такие грибы – дрожжи. Грибы размножаются спорами, половым размножением, фрагментации, наука изучающая роль грибов в природе и патологии – микология.

6. Характеристика риккетсий, хламидий

Риккетсии – мелкие полиморфные внутриклеточные бактерии. Названы в честь Риккетса в 1909 г. Они составляют порядок  Ricketsiales, 3 семейства, в составе семейства Ricketsiaceae 8 родов. Форма - коккоподобные палочки. Вызывают у человека и животных специфические заболевания – риккетсиозы. Природными носителями риккетсий являются членистоногие (вши, блохи, клещи, пухоеды). Спор не образуют. Неподвижны. Размножаются поперечным делением. Имеют клеточную стенку, ЦПМ, рибосомы, ядерный аппарат. Геном представлен ДНК и РНК.

Патогенные виды вызывают у животных ку-лихорадку или куриный риккетсиоз. Человек может заражаться от больных животных через молоко, мясо. Rickettsia prowacheka – сыпной тиф. Rickettsia typhi – эндемический (крысиный) тиф.

Хламидии – внутриклеточные паразиты, которые отличаются от других микроорганизмов циклом развития и механизмом адаптации к внутриклеточным условиям. Относятся к семейству Chlamidiaecae. К роду  Chlamidia относят:

▪ C.trachomatis - возбудителя трахомы человека; ▪ C. suis – возбудителя хламидиоза свиней;

▪ C. muridarum циркулирует у хомяков и мышей;

К роду Clamydophila относят:

▪ C.pneumonia-  возбудитель пневмонии у человека и лошади;

▪ C. pecorum, C. abortus – возбудитель хламидиоза крс, мрс, свиней;

▪C. psittaci – возбудитель орнитоза птиц и человека; ▪ C. felis – возбудитель хламидиоза кошек.

7.Характеристика микоплазм и L-форм бактерий

Микоплазмы – мельчайшие свободноживущие прокариоты, не имеющие выраженной клеточной стенки – её роль выполняет трёхслойная цитоплазматическая мембрана. Обладают выраженным полиморфизмом (от мелких сферических до нитевидных ветвящихся форм). У животных микоплазмы вызывают следующие заболевания: Micoplasma micoides – плевропневмония КРС, Micoplasma agalactia – агалактия коз, Micoplasma pneumonia – возбудитель пневмонии человека.

L-формы бактерий образуют все бактерии под действием противомикробных препаратов. Они не имеют клеточной стенки, могут длительно находится в окружающей среде, активно размножаются в организме. Устойчивы к антибиотикам.

L-формы бактерий были выделены в 1935 г в институте Листера в Англии. Обладают относительно высокой жизнеспособностью и выраженной способностью к репродукции. Различают стабильные и нестабильные L-формы бактерий. Нестабильные способны образовывать клеточную стенку после прекращения действия агента, стабильные по своим свойствам сходны с микоплазмами, крайне редко переходят в исходные бактериальные клетки. Инфекционные процессы, вызванные L-формами бактерий, характеризуются атипичностью, лительным течением, трудно поддается лечению химиопрепаратами.

Бактерии с частично разрушенной ЦПМ называются сферопласты.

Бактерии с полностью разрушенной ЦПМ – протопласты.

8. ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИНОМИЦЕТОВ.

Актиномицеты крупные палочковидные клетки, способные к ветвлению и формированию сплетений, напоминающих мицелий грибов.

Относят актиномицеты к порядку Actinomycetales, В составе которого семейства: Actinomycetaceae, Streptomycetaceae, Nocardiaceae.

Актиномицеты обитатели почвы, многие виды продуценты антибиотиков: Streptomyces micromonospora – стрептомицина; Actinomyces fradiae - неомицина; Actinomyces aeroofaciens – хлортетрациклина; Actinomyces rimosus – окситетрациклина; Actinomyces venesuella – хлорамфеникола.

Среди актиномицетов есть один возбудитель Actinomyces bovis, вызывает актиномикоз крупного рогатого скота с поражением подкожной клетчатки, мышц, костей. Образующаяся гранулома развивается на нижней челюсти преимущественно у крупного рогатого скота и может метастазировать во внутренние органы.

Семейство Actinomycetaceae включает род Bifidobacterium, в составе которого 24 вида бифидобактерий – обязательных обитателей слизистой толстого отдела кишечника, формирующих биопленку на поверхности слизистой, обеспечивающих колонизационную резистентность – защиту организма от возбудителей, гнилостных бацилл, способствующих всасыванию питательных веществ, макро-, микроэлементов.

9.Способы размножения микробов

Под размножением микробов подразумевают способность их к самовоспроизведению, т. е. увеличению количества особей микробной популяции на единицу объема.Отдельные группы микроорганизмов размножаются различными способами. У бактерий преобладает деление, может быть почкование. Грибы размножаются при помощи спор, вегетативным способом (участками мицелия), половым путем и почкованием (дрожжи). Вирусы размножаются путем репродукции вирусных частиц внутри клетки- хозяина.

10. Механизм питания. Химический состав бактериальной клетки.

1.        Механизм питания

Клетка поглощает лишь те вещества, для которых существует транспортная система в виде пермеаз, белков, имеющих функции ферментов.

Проникновение питательных веществ и других происходит четырьмя способами:

•Простой диффузией - медленно за счет разности потенциалов клеточной стенки проникают все вещества, присутствующие в субстрате, в том числе ядовитые для бактериальной клетки

•Облегченной диффузией при участии пермеаз. Скорость зависит от концентрации

•Активным транспортом при участии пермеаз и затратами энергии протонного потенциала.

•Транслокацией с участием ферментов, энергии и преобразованием питательных веществ. Так дисахариды, полисахариды проникают в клетку в виде моносахаров. Таким образом сахара проникают в фосфорилированной форме. Это обусловлено крупной молекулярностью ди- и полисахаридов.

Выделение у бактерий изучено слабо, но известно, что происходит оно с участием транспортной системы и неконтролируемой диффузии.

2. Химический состав бактериальной клетки.

Больше всего в клетке воды - 75-85%, в спорах 50%. Сухого вещества - 15-25%, 80% сух вещества составляют белки -  протеины и протеиды, а больше всего нуклеопротеидов.

Углеводы - 12-28% сух вещества в виде полисахаридов (ПС) и липополисахаридов (ЛПС).

Липиды -3,8-40% (у возбудителей туберкулеза, дифтерии). Представлены ЛПС, входят в состав клеточной стенки, мембран, обусловливают устойчивость клетки к механическим повреждениям.

Минеральные вещества - 2-14%. Макроэлементы - натрий+, калий+, хлор-, кальций++, магний++, фосфор, железо. Микроэлементы - цинк, медь, кобальт, барий, марганец и др.

11. Типы питания микроорганизмов

Для существования микробов им необходимы источники жизнедеятельности.

•Источник энергии. По типу источника энергии микробы подразделяют на:

Фототрофы, способны усваивать энергию солнечного света. Такая способность обусловлена наличием у бактерий и водорослей бактериального хлорофила (БХЛ) (открытие микробиологов МГУ).

Многие виды микробов в качестве источника энергии могут использовать только органические или неорганические вещества. Их обозначают к хемотрофам.

•Вторым источником существования являются доноры электронов или окисляемый субстрат. По типу подразделяют:

Литотрофы - донор неорганическое соединение.

Органотрофы - донор электронов органические вещества.

•Третий источник существования - источник углерода. Автотрофные микробы могут использовать в качестве источника углерода СО2, но подавляющее большинство используют углерод из сложных органических соединений - белков, пептонов, аминокислот. Их называют гетеротрофы.

Принимая во внимание источники существования различают 8 типов питания бактерий:•Фотолитоавтотрофы(полезные)•Фотоорганоавтотрофы •Хемолитоавтотрофы•Хемоорганоавтотрофы•Фотолитогетеротрофы•Фотоорганогетеротрофы•Хемолитогетеротрофы•Хемоорганогетеротрофы(возбудители и сапрофиты)

Хемоорганогетеротрофное питание по источнику азота подразделяют на:

•Метатрофное, когда потребности в азоте удовлетворяются за счет аммиака и аммонийных солей мертвых белков. Микробы, имеющее метатрофное питание, называют сапрофитами.

•Возбудители инфекционных болезней используют белки, аминокислоты живых организмов чтобы извлечь азот. Такое питание называют паратрофное, а микробов, имеющее такое питание - паразитами. К ним относят возбудителей.

У микроорганизмов есть способность в зависимости от условий существования менять тип питания.

12. Токсины микроорганизмов

Токсины - ядовитые соединения, которые образуют патогенные микробы. Токсины, которые выделяются в окружающую среду, называют экзотоксинами. Возбудителей, продуцирующие экзотоксины, называют токсигенными.Микробы, содержащие ядовитые соединение в составе структур клеток, называют токсичными, а соединения, входящие в состав структур микроорганизмов - эндотоксинами. Эндотоксины прочно связаны с клеткой и освобождаются только после ее гибели.

По современным данным большая часть эндотоксинов также прочно связаны с клеткой и освобождаются только после аутолиза. По химической природе токсины:•Белковые •ЛПС-токсины

ЛПС-токсины разных возбудителей клинически вызывают однотипную реакцию. От небольших- повышение температуры тела, диарея. От больших доз - упадок сердечной деятельности, спазм сосудов, может быть коллапс. Самый сильный ЛПС-токсин содержат сальмонеллы.

Белковые токсины различают на:

•Нейротоксины, действуют на синапсы и моторные нейроны, продуцируют возбудитель столбняка, ботулизма. Клинически судороги, парезы, параличи. •Гистотоксины, вызывают воспаление с омертвлением тканей. Клинически проявляется расплавлением тканей и увеличением площади раны (синегнойная палочка, золотистый стафилококк, анаэробы). •Энтеротоксины, вызывают воспаление слизистой тонкого и толстого кишечника. Клинически диарея (понос), токсикоз, (патогенная кишечная палочка, сальмонеллы, анаэробы). •Лейкоцидины - ядовитые вещества, разрушающие лейкоциты, нейтрофилы, лимфоциты, от чего снижается сопротивляемость организма и может сформироваться иммунодефицитное состояние (Золотистый стафилокок)

•Гемолизин - белок, разрушающий эритроциты, (возбудитель сибирской язвы, от чего происходит полный гемолиз крови у больных и отек легких). По биологической активности и ядовитости токсины неодинаковы. Одни из них полностью определяют патогенез (механизм развития инфекционной болезни), другие имеют ограниченное участие в инфекционном процессе.

13.Типы дыхания микроорганизмов

Дыхание -биолог. окисление орган.соед. По типу дых. бактерии делят: Анаэробное (полное,неполное). Полное- субстрат оксляется под влиянием О2.Образуется 2874 кДж.Бактерии имеющие полное дыхание назыв. термофильными, обитатели почв , навоза, вызывают нагревание влажных субстратов Неполное происходит обр. орган.кислот. используют в качестве продуцентов уксусной,янтарной и лимонной кислот , выделяется 473 кДж энергии ,но возможно полное аэробное окисление спирта с обр. СО2 и Н2О с 1400 кДж . Анаэробное дыхание- без доступа О2. Различают: Нитратное- акцептором о2 является нитраты и Сульфатное- акцептором О2 явл сульфат.Брожение- разновидность анаэробного дыхание - расщепление углеродосодержащих веществ. может быть : спиртовое,молочнокислое,маслянокислое,ацетоно-бутиловое.Факультативное дыхание -имеют ферменты,которые позволяют жить как в анаэробных.так и аэробных условиях. Однако они тяготеют определенные условия. Например, E. colli лучше размножается в аэробных условиях, а Bac. antrocis - в анаэробных. Макрофэробнофильное- дыхание при низком давлении воздуха.( возбуд . бруцеллеза)

14.Сруктура бактериальной клетки

Существуют поверхностные и глубокие структуры. Поверхностные: капсула – образование углеводной природы для защиты клетки от повреждений, высасывания, проникновения фагов и токсических веществ, а у возбудителей от фагоцитоза. Не является жизненно необходимой. Жгутики-полые выросты из сократимого белка флагеллина, органы движения плавающих бактерий (бактерии перитрихи – вся поверхность покрыта жгутиками, монотрихи – 1 жгутик, лофотрихи – пучек жгутиков на одном полюсе клетки, амфитрихи – несколько жгутиков биполярно). Ворсинки – тонкие волоски (10-несколько тысяч): фимбрии (покрывающие поверхность клетки для прикрепления к субстрату) ,f- пили (участвуют в конъюгации бактерий).Клеточная стенка – тонкая, эластичное образование из муреина, в состав клеточной стенки грибов входит хитин. Функции: защитная, придает форму клетки, транспорт питательных веществ, выделения продуктов метоболизма. Повреждение приводит к гибели.Сферопласты – форма бактерий, частично лишенных клеточной стенки, протопласты -  полностью лишены, L – формы дефективные по клеточной стенке. ЦПМ – сетчатое образование из двух слоев липидов и встроенного белкового, орган обмена веществ, функции: осматический барьер, синтез капсулы и клеточной стенки, к ней прикреплены жгутики.

Глубокие: Мезосомы – локальные впячивания ЦПМ в цитоплазму. Содержат ферменты переноса элементов и окислительного фосфолирования. В них идёт синтез энергетических соединений. нуклеотид (структура, где располагается двуспиральная, закольцованная ДНК) – плазмиды (дополнительная ДНК, кодирующая специфические св-ва бактерий. К ним относят устойчивость бактерий к противомикробным  средствам. Не у всех.) – рибосомы- (стр-ры где идет синтез бактериального белка) - включения (запасные пит.в-ва или сконцентрированные продукты обмена. Чаще углеводной природы – полисахарид, а так же могут быть воски, полифосфаты, кристал.белки с токсичным действием).

15.Классификация питательных сред

Питательные среды- субстраты для выращ.бактерий. Они должны быть: Полноценны по пит.составу, содерж. вещ-ва в легкоусвояемой форме. Изотоничными. Иметь оптимальную Рн среды(7,0-7,2 чаще всего). Иметь оптимальный окислительно-восстановительный потенциал.Быть стерильными. Пит. среды готовят : из продуктов животного происхождения, растительного и синтетически из химически чистых соединений.Классификация пит.сред.В зависимости от уели применения: Общего назначения - для выращивания разных видов бактерий. Элективные - для выр. отдельных видов прихотливых бактерий. Дифференциально- диагностические-для определение вида бактерий.По концентрации: Жидкие, полужидкие, твердые. Среды общего назначения : МБП - мясная вода, 1% пептона и 0,5 Nacl. МПА- горячий МПБ + 2-3% агар-агар. ПБ , ПА- Готовят из концентрата на основе гидролиза белков рыбы . МА-ФАнМ- готовят из концентрата на основе гидролизата молока, обогащенная автолизатом дрожжей и фосфатом. Элективные среды готовят из основных , чаще испол. МПА и ПА + 5-10% сывороточного агара , кровяного агара, дрожжей , красителей. Используют концентраты : Солевой бульон, молочно-солевой агар, Среда СДА, Дифференциально-диагностические среды включают: Среда Гисса для изучение биохимический свойств бактерий , Среда ЭНДО,Левина , висмут-сульфит для распознания роста кишечной палочки и сальмонелл. Среда Клигера для выявления способности бактерий расщеплять глюкозу. Китт-Тароцци для выращивания анаэробов. Дифференциальный улучшенный клостридиальный бульон для учета клостридий в пищевых продуктах. RCM готовят из концентрата. среда Сабуро и Чапека для выращивание грибов ,готовят из концентрата. Кукурузно- лактозная среда для выращивания бифидобактерий

16. Культивирование микроорганизмов.

Культивирование - это выращивание бактерий на пит.средах. Глубинное культивирование - выращивание больших объемов бактерий на жидких и полужидких средах в биопробах. необходимы условия: Оптимальная t.Оптимальная PH среды ( обычно 7,0-7,2), оптимальный окислительно-восстановительный потенциал.Для анаэробов - вакуум,аэробов - стерильный кислород. В Лаб. культивирование происходит при оптимальный и постоянной t , для анаэробов- бескислород. условия. Глубинное культивирование проводят в биореакторах, с соблюдением всех параметров ,поэтому оно более результативное . Чистая культура- популяция бактерий одного вида, выращенная на пит.среде. Смешанные культуры - культуры , полученные в результате размножение нескольких видов бактерий(уничтожаются). Штамм - культура, имеющая чёткие видовые свойства.Клон- культура, выращенная из одной бактерии. Посев - внесение исследуемого материала в пит.среду . несколько способов посева: Способ Дригальского- штрихами по поверх.пит.среды в чашке Петри. Глубинное, вносят исследуемый материал в чашку Петри заливают расплавленной, затем охлажденной. Уколом- сеют на полужидкие и плотные среды с помощью бактериологической петли. Смешивание исследуемого материала с жидкой пит.средой с помощью бактериолог. петли Зигзагом сеют на плотные среды в пробирках . Газоном , равномерное распределяя бульонную культуру. По Шукевичу , помещают в конденсат плотной питательной средой в пробирке .Бактериологическое исследование - выделение микроорганизмов из среды их обитания для получение чистой культуры

17.Фазы роста бактериальной популяции

Рост-необратимое увеличение числа клеток. Рост бактерий после посева на питательную среду происходит по фазам:I – начальная, лаг-фаза. После посева бактерии адаптируются. Продолжительность различна, зависит от пит.среды, характера бактерий (примерно 4 часа). Заканчивается с наступлением размножения. II – экспоненциальная, логарифмическая. Характеризуется постоянной максимальной скоростью деления клеток. Скорость зависит от вида бактерии: E.coli – 20 мин, нитробактерии – 5-10 ч. За этот период образуется огромное количество бактерий и происходит значительный расход субстрата. Бактерии в этой фазе имеют большие возможности к делению, но среди них много неполноценных, неустойчивых к воздействию внешних факторов, которые к концу фазы погибают. III – стационарная. Начинается с появления погибших м/о. характеризуется равнодействием между размножением и делением. Скорость роста снижается из-за нехватки субстрата, большой плотности популяции, нехватки О2, накопления токсических продуктов. Количество биомассы, полученное в этой фазе, называется выходом. В конце стационарной фазы возрастает гибель клеток и наступает следующая фаза. IV – фаза отмирания. В живых остается много клеток, но они находятся в состоянии покоя и не размножаются.Рост для большинства бактерий заканчивается за 16-24 ч. У микобактерий туберкулёза – рост 21 день, у возбудителя бруцеллеза – 30 дней.

18.Сущность спиртового и молочнокислого брожений

Брожение - расщепление органических соединений в анаэробных условиях с образованием большого количества промежуточных продуктов. СПИРТОВОЕ БРОЖЕНИЕ происходит на углеводном субстрате при участии хлебных дрожжей Saccharomyces cerevisia. Различают два типа спиртового брожения: верховое (t=18+30) для производства спирта. идет бурно:, и низовое брожение для приготовления пива (t= не выше 100), идет медленно. Для спиртового нужно: рН 4,0-5,0, в промышленности субстрат-полисахариды зерна, картофеля, древесных опилок. Образуются побочные продукты, они ядовитые и токсичные, имеют маслянистую консистенцию и их называют сивушные масла. Спирт требует очистки. Существует несколько технологий очистк, качество зависит от очистки. При рН 8 и более продуценты преобразуют субстрат по типу гидролиза до уксусной кислоты, глицерина и углекислого газа, используют для производства глицерина. МОЛОЧНОКИСЛОЕ БРОЖЕНИЕ проводят молочнокислые бактерии. Они могут дисахарить лактозу и образовывать глюкозу, а затем окислять молочную кислоту. Бактерии мезофильные (активно размножаются при t0 +20 +40), психрофильные (0 +10), термофильные (+40 +60). 3 типа брожения: Гомоферментативное брожение, когда глюкоза превращается в две молекулы молочной кислоты(Str. lactis, Str. Thermophilus и др. и палочки Lactobacиллы. lactis, Lactobac. Acidophilus и др.) Гетероферментативное брожение, когда глюкоза превращается в молочную кислоту, спирт и углекислый газ, проводят молочнокислые дрожжи: Saccaromyces lactis, Lactobac. Brevis. Бифидоброжение, когда глюкоза преобразуется в две молекулы молочной кислоты и три молекулы уксусной кислоты. Продуценты молочнокислого брожения используют в качестве заквасок для приготовления кисломолочных продуктов, бактериальных препаратов для силосования. Бифидобактерии, ацедофильную палочку используют для приготовления пробиотиков – препаратов, содержащих живые полезные бактерии, и диетических молочных продуктов.

19.Характеристика пропионовокислого, маслянокислого, ацетонобутилового брожений

Брожение - расщепление органических соединений в анаэробных условиях с образованием большого количества промежуточных продуктов. ПРОПИОНОВОКИСЛОЕ БРОЖЕНИЕ проводят пропионовокислые бактерии(обитатели почвы). Они в анаэробных условиях три молекулы глюкозы превращают в четыре молекулы пропионовой кислоты, две молекулы уксусной кислоты, молекулы углекислого газа и две молекулы воды. Продуценты пропионовой кислоты -Propionibact. acnes, Propionibact. acidipropionici. Субстрат-молочная кислота, преобразуя её в пропионовую и уксусную, что значительно понижает рН силосной массы. Препарат ПКБ используют для предотвращения закисления силосной массы, содержит пропионибактерии. Пропионибактерии обитают в рубце жвачных и там преобразуют глюкозу в пропионовую и уксусную кислоты, которые относят к ЛЖК. Пропионобактерии – продуценты витаминов группы В, активно их образуют в рубце жвачных и в толстом отделе кишечника. Пропионовокислое брожение всегда идёт при силосовании. МАСЛЯНОКИСЛОЕ БРОЖЕНИЕ ведут сапрофитные микробы: Cl. pasterianum, Cl. butyricum, а также возбудители злокачественного отека, эмкара, столбняка, ботулизма. Маслянокислые клостридии обитают в почве, являются анаэробами. Четыре молекулы глюкозы они превращают в три молекулы масляной кислоты, две молекулы уксусной кислоты, восемь молекул углекислого газа и восемь молекул водорода. В промышленности производят масляную кислоту (бутират), продуцент бутирата – Cl. butyricum. Маслянокислое брожение вызывает порчу молочнокислых продуктов и сыров. Проходит маслянокислое брожение и в рубце, где уксусная и масляная кислоты переходят в ЛЖК, а углекислый газ и водород – для отрыжки. АЦЕТОНОБУТИЛОВОЕ БРОЖЕНИЕ имеет большое практическое значение. Происходит на субстрате кукурузной муки. Продуцент – Cl. acetobitylicum, которая преобразует субстрат до бутилового, изопропилового, этилового спиртов и ацетона. При этом образуются водород и углекислый газ, которые идут на синтез метилового спирта.

20.Мутации микроорганизмов

Мутации – внезапные изменения свойств микробов, которые передаются по наследству.Суть в изменении последовательности нуклеотидов хромосомы или в изменении состава нуклеотидов на уровне утраты аминокислот. Изменчивость на основе утраты синтеза аминокислот называется ауксотрофностью. Бактерии, изменившие свойства в результате мутации, называют мутантами.

2вида причин мутаций:Спонтанные – под действием неизвестных факторов окружающей среды. Индуцированные – в результате действия специфических факторов УФЛ, t0, гамма-излучение, химические вещества. Различают прямые мутации и обратные (реверсии). Реверсии воспроизводят экспериментально с вакцинным штаммом VR-2, его вернули к дикому типу.

21. Рекомбинации бактерий.

Микробом свойственна наследственность и изменчивость. Материальная основа наследственности - Хромосом, которая имеет 5 тыс. нуклеоидов. у некоторых есть Днк -плазмидная. Различают 2 типа изменчивости: Фенотипическая- наследуется, изменяются сво-ва микробов. Такой феномен называют диссоциацией. Такие микр-мы не исследуются. Генотипическая- наследственная. Происходит под дейст. стрессовых факторов. Происходит из-за мутаций и комбинаций. Рекомбинация- наследуемое изменение свойств микробов из-за передачи ген.материала от микро-ма к другому микро-му. Есть доноры и реципиенты. Различают 3 типа рекомбинации: Общая- у одного вида микроо-мов. Незаконная- у микро-мов разных видо в родов. Гены мигрируют по хромосоме и Днк- плазмиде. Сайт-специфическая- встраивание гена в хромосому или ДНК-плазмиду при участии спец.ферментов. Рекомбинации происходят в результате: Трансформации - происходит в результате пребывание микроор-мов в субстрате бактерий разных видов и штаммов.Трансдукция- гены переносят умеренные фаги. Конъюгация - переход ген. материала плазмид при контакте бактерий через отверстие пилей. Бактерии имеющие пили- F+,не имеющие F-, конъюгация свойственна таким видам как: кишечная палочка, сальмонеллы , золотистый стафилоккок. Науке известна передач генов в хромосоме при конъюгации

22. МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ.
Стерилизация – уничтожение всех форм микроорганизмов в материале.
Предстерилизационная обработка посуды, инструментов включает следующие этапы: ополаскивание; замачивание в моющем растворе;  мытье щеткой; ополаскивание, сушка.
Для стерилизации используют методы: фломбирование (прожигание) над пламенем спиртовки; кипячение в дистиллированной воде или 1-2%-ном растворе гидрокарбоната натрия, не менее 45 мин; сухим жаром в сушильном шкафу, используют для посуды, хирургических инструментов; паром под давлением в паровых стерилизаторах - стерилизуют питательные среды общего назначения; Шприцы, иглы, инструменты, перевязочный материал стерилизуют в биксах.Пипетки, чашки Петри заворачивают в бумагу, флаконы закрывают ватно-марлевыми пробками затем стерилизуют. Срок сохранения стерильных предметов в биксах 20 суток, в остальных упаковках - 3 суток. Для контроля работы автоклава применяют индикаторы; текучим паром в аппарате Коха на протяжении трех – пяти дней стерилизуют питательные среды, соки, консервы для детского и диетического питания, с целью сохранения витаминов, ферментов, тиндализация-(дробная стерилизация ) проводят на водяной бане в течение 6-7 дней. Тиндализацию используют для стерилизации кровезаменителей, иммунных сывороток, глобулинов, питательных сред; фильтрацию через бактериальные фильтры мембранные или глубинные, задерживающие микроорганизмы и их споры.Мембранные фильтры изготавливают из эфиров целлюлозы, тефлона, акрила, полимеров.
Глубинные – из волокнистых материалов (хлопок, шерсть); ультрафиолетовое облучение для стерилизации воздуха ,используют облучатели ОБН, экспозиция облучения 2 часа.
Пастеризация – уничтожение только вегетативных форм микроорганизмов, споры остаются живыми. Применяют для молока, пива,чтобы увеличить срок реализации, а в молоке уничтожить возбудителей туберкулеза, бруцеллеза.
Химические методы стерилизации Рекомендуются для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозионностойких материалов. Применяют газы и растворы. Для газовой стерилизации применяют: окись этилена, смесь ОБ (смесь окиси этилена и бромистого метила в соотношении 1:2,5),
В связи с токсичностью окиси этилена и бромистого метила применение стерилизованных изделий допускается только после их выдержки в вентилируемом помещении до допустимых остаточных количеств по НТД. Для химической стерилизации растворами используют перекись водорода и надкислоты:  6%-ный раствор перекиси водорода в течение 6 часов;  1%-ный раствор дезоксона – 45 мин. Химическую стерилизацию растворами проводят в закрытых емкостях из стекла, пластмассы при полном погружении в раствор на время стерилизации. После этого изделие должно быть промыто стерильной дистиллированной водой.
Радиационный метод стерилизации используют для изделий из пластмасс, изделий одноразового использования в упаковке, перевязочных материалов, некоторых лекарственных средств.

23. ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ И АНТИСЕПТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

.В зависимости от целей применения противомикробные препараты делятся : Дезинфицирующие, антисептические и химиотерапевтические. Дезинфицирующие - ядовитые соединения для уничтожение возбудителя в окр.среде. К ним относят препараты, содержащие галоиды,щелочи, кислоты и т.д. Анион -обладает широким бактериологическим действием на широкий спектр микро-мов.Галоидосодержащие препараты включают: Хлорная известь , содержит 26-35% активного хлора, применяют 2% раствор. Хлорамид Б и ХБ 26-28% актив.хлора. применяют ввиде неактивированных 0,2-5%-ных растворов.Препарат ДТСГК 47-55% активного хлора , применяют 0,2-10% раствор. Препарат ДП-2 ,содержит 40% актив хлора , применяют 0,5-7% растворы . Актив-люкс -для профилактики. Каустическую Соду применяют 2-10%. к Кислородосодержащие : Перекись водорода 1-6% растворы. Надкислоты ,например надуксусная , применяют в виде 0,1-1% раствор. Биопаг - содержит перекись водорода , 1-6%. Фенол содержащие: Фенол в виде 3-5% растворов , Лизол в виде 2-% растворов. Поверхностно-активные дез. относят : Пиртан, Амфолан и 3Д-Септ. Альдегиды: Формальдегид. Входит в состав формалина. Глутаровый альдегид. современные средства имеют комбинированный состав формальдегида,хлорида аммония солей, нитрилтрехуксусной кислоты и ПАВ : Экоцид, макродез. Антисептические препараты - используют для уничтожения мир-мов на коже, слизистых , в ранах .Ведущие препараты : Настойка йода, этиловый спирт, Перекись водорода 3% раствор, раствор фурациллина 1:5000, 1% раствор борной кислоты для промывания слизистых. Хлоргексидин

24. ХАРАКТЕРИСТИКА ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ.
Химиотерапевтические препараты - химические вещества избирательного действия против болезнетворных микробов в условиях микроорганизма. Основоположник химиотерапии - П. Эрлих, синтезировавший в 1910 году первый химиотерапевтический препарат сольварсан, содержащий соединения мышьяка.
Первыми нетоксичными средствами были сульфаниламидные препараты. Впервые синтезированы Домагком в Германии в 1935 году и П.А. Куянцевым в 1939 году в СССР (стрептоцид). Широко применяют в/в и внутрь. Ведущие препараты: бисептол, стрептоцид растворимый, сульгин, сульфален, фталазол и др. Структурно близкие к сульфаниламидам парааминосалициловая кислота (ПАСК) и сульфоны (дапсон), эффективны для лечения различных микобактериозов (туберкулез, лепра).
Производные нитрофурана- синтетические нитрофуранальдегиды, вызывающими бактерицидный in vitro. Применяют внутрь для лечения инфекций ЖКТ и мочевыводящих путей (фуразолидон, фурагин, нитрофурантоин, нифуроксазид).
Хинолоны самые эффективные противомикробные препараты, широкий спектр действия. Применяют в/м, в/в и внутрь (энрофлоксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин, норфлоксацин, левофлоксацин, налидиксовая кислота).

25. Антибиотики , классификация.

Антибиотики- химические вещ-ва биолог.происхождения , их производные, подавляющие болезнетворных микробов и задерживающие рост злокачественных опухолей. Первооткрыватель - Флемит(1928г).Первый препарат-Пенициллин-Чрейн Флори в 1940. В СССР- Ермольева в 1942г.В 1943г- Ваксман разработал стрептомицин. Сущ. несколько видов классификации антибиотиков. По типу антимикробного действ:1.Бактерицидные(убивают микроорганизмы)применят для лечения тяжелых инфекций 2.Бактериостатические- задерживают рост.(тетрациклин).применяют при инфекциях средней тяжести ,внутрь. По механизму действия :1.Ингибиторы синтеза клеточной стенка. 2.Нарушающие молекулярную организацию и функцию клеточных мембран. 3. Подавляющие синтез белка на рибосомах.4.Ингибиторы синтеза РНК. 5. Ингибиторы синтеза РНК-противоопухолевые цитостатики.Для лечения подбирают антибиотики с учетом чивствительности к ним возбудителя. .существует лечебная классификация. все антибиотики подразделят на группы :1. Группа пенициллина против грамм+ бактерий.Ведущий пенициллин. В настоящее время применяют - амокоциллин.2.Группа стрептомицина, против грамм-. Стрептомицин ведущий. 3. Группа цефалоспоринов в настоящее время испол. 5 поколений ЦС.цетрин снят с про-ва ,но используют его производные - цефалексин, цефатоксин, клафоран, тиеркал.. Аминогликозиды - бактерициднодействующие.против грамм - бактерий. Известно 3 поколения аминогликозидов:1. Стрептомицин.2.Гентамицин.3.Амикацин.5 греппа тетрациклина- широкий спектр ,дейтствуют против хламидий. 6.Макролиды- имеют бактериостатическое действие против риккетсийЮ хламидий, микоплазм. Ведущий тилан,тилозин.7. Ликомицин- бакт. действ. ведущий- Ликомицин. 8.Группа рифампицины- широкий спектр , а так же против возбудителя некроза. 9. Группа хлорамфеникола- широкий спектр . против кишечной палочки и сальмонелл. аналог- левомицетин в ветеринарии- флорокс.10. Группа плевромутилины - бактериос.дейст., широкий спектр. Денакард- внутримышечно и внутрь

26. ПРОДУЦЕНТЫ И ПРИМЕНЕНИЕ АНТИБИОТИКОВ.
Применение антибиотиков
Антибиотики применяют:
1.Для лечения инфекционных заболеваний и других, вызванных микробами. При тяжелых инфекциях их применяют в/м. При средней тяжести - внутрь. Обязательно применяют курсом 5-10 дней. Эффективность антибиотикотерапии определяют по снижению температуры и улучшению общего состояния.
2.Для консервирования продуктов используют ХТЦ, низин для консервирования пищевых продуктов в консервы зеленого горошка, икры для смягчения режима стерилизации.
3.Для усиления роста молодняка.
Продуценты антибиотиков
1.Грибы из рода Penicillium. P.crustosum - продуценты мицелина, соль пеницелановой кислоты. Продуценты гризиокульбина
2.Грубы цефалоспорины. Продуценты цефорина и его производных. Антибиотиков ЦС-группы.
3.Актиномицеты - продуценты стрептомицина, хлоранфеникола, гентомицина.
4.Почвенные бациллы. Bac.polymyxa - продуцент полимиксина, Bac.brevis - грамицидина (наружно), Bac.subtilis - субтилина.
5.Молочнокислые бактерии. St.lactis - продуценты низина.
6.Грибы аскомицеты и базидиомицеты.
7.Лишайники
8.Водоросли. Chlorella vulgaris - хлореллин - бактериостатическое действие.
9.Ткани рыб, птиц. Применяют для консервирования икры.
10.Хим.синтез - получают лишь некоторые антибиотики, которые применяют наружно или внутрь, только ЦС в/м. Левомицетин, синтомицин

27. Кормовые антибиотики.
Высушенная биомасса продуцента, которые используют для профилактики инфекционных заболеваний и стимулирования роста молодняка.
Подразделяют:
• Лечебные для профилактики инф.болезней и долечивания после курса бактерициднодействующих (терралитин, содержит окситетрациклин; биовитин содержит ХТЦ; биовин - ХТЦ и витамин В12; фрадизин - тилозин)
• Стимулирующие. Относят кормолизин - содержит лизин против грам- бактерий; бациллихин - сод.бацитроцин против грам+ бактерий; флавомицин - широкий спекрт; альбак - гранулят для цыплят.
Стимулирующие кормовые антибиотики подавляют гнилостную и избыток факультативной микрофлоры кишечника. Активизируют гормоны роста. В совокупности повышается всасываемость макро- и микроэлементов, витаминов в кишечнике. Лучшие результаты стимулирования у молодняка достигаются попеременным применением стимулирующих кормовых антибиотиков.
Кормовые антибиотики применяют только молодняку и в товарных хозяйства. Порядок применения регламентирован инструкцией 1982 года.

28. ХАРАКТЕРИСТИКА БАКТЕРИОФАГОВ.
Бактериофаги - это вирусы, паразит-щие у бакт.и прояв-щие свое действие лизисом микроорг-ов.Первооткрыватель фагов англ-ий ученый Творт в 1915 г., Гамалея - совет. уч.Первый бакт.фаг в России был выделен Д'Эррелем в 1917 г.В наст-ее время фаги выделены у всех видов бактерий,бацилл,актиномицетов,грибов.Под электр.микро-пом различ неск морфол-ских типов фагов: 1- классич с головкой и сокращающимся отростком;2-нитевид фаги;3-с головкой и многочис-ми отростками;4-с головкой и не сокращ-мся отростком;5-с головкой и коротким отростком. Фаги сост из:генома, который представ ДНК или РНК, капсида и суперкапсида.Извест пять морфолог-ких типов суперкапсида.Взаимодей фага с клеткой изуч у многих фагов.Нач с прикрепл-ия (абсорбции),птом проникн-ия и устремления генома фага в хрмсму клтки. После интеграции (встраивания) генма в хрмсму измен метабол клтки, клтка нач репродуцировать фаги, а их накопл разрыв оболчку, и фаги атак нвые клтки. Этот прцесс остнвить нльзя. Фаги уничтож до послед клтки микроорг-ма. Были приготовл мнгие фаги(дизентерийный, брюшнотифозный, холерный).Фаги, вызв-щие гибель микроорг, назыв вирулентными.Известн умеренные фаги, они активно мигрируют в клтках,не вызыв их лизиса,и участвуют в трансдукции (рзнвиднсти рекомбинации у бактерий).
Фаги применяют:1-Для лечен кишчных инфекц заблвний.В вет-рии выпскают один еднствнный фаг—сальмофаг для леч и прфилктки паротифа уток.2-Для леч гнойных фаз.Во Франции выпуск фаги, кот использ внтрвенно для леч синегнойного бктерийнго сепсиса.Эффект леч фагов быстр, за 1-2 суток уничтож возбудит в орг-ме в том случае,если к фагу взбдитель чувствит.3-Для опред-ия вида бктрий выпуск диагнстичские фаги:сибиреязвенный.В кач-ве вектора для перноса генов использ умеренные фаги для переноса генов.Фаги обитают там, где их хзяева.Фаги против кишечн плчки, сальмонелл—в сточных канал-ых водах,в раневом отделяемом,в фекалиях больных,в гное ран.

29. МИКРОФЛОРА ПОЧВЫ, САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА.
Санитарно-бактериологическую оценку почвы проводят согласно метолических указаний.
Подлежат исследованию почвы:
● детских дошкольных учреждений 2р в год;
● участков под жилищное, животноводческое строительство, зон на месте бывших свалок, кладбищ
● вблизи колодцев и рек
Образцы почв массой 200 г берут с двух участков площадью 25 м2 в пяти точках на глубине 10 см, на бывших кладбищах и свалках – 25 см. Санитарно-бактериологическое исследование включает определение:
● коли-индекса (количество бактерий кишечной палочки в 1 г почвы), посевом разведения почвы 1:10 на 5 чашек со средой Эндо;
● индекса энтерококков (количества энтерококков в 1 г почвы), посевом разведения почвы 1:10 на 5 чашек с сывороточно-теллуритовым агаром;
● патогенных бактерий, посевом разведения почвы 1:10 на 5 чашек с кровяным агаром;
● сальмонелл, посевом 1 г образца на селенитовый бульон.
Посевы выдерживают 24 часа, подсчитывают количество колоний. Если больше 9 колоний, то место грязное
При наличие роста на селенитовой среде исследования продолжают: делают посевы на среду Эндо, отсевают бесцветные колонии, идентифицируют выделенную культуру по биохимическим, протеолитическим и антигенным свойствам.
Способность почвы к самоочищению обусловлена:
● деятельностью гнилостных бацилл и бактерий разлагать белковые соединения животного, растительного происхождения;
● минерализацией образующегося при гниении аммиак нитрифицирующими бактериями;
● активностью целлюлозолитических бактерий в аэробных и анаэробных условиях раз-лагать клетчатку, минерализовать образующиеся соединения.

30. АММОНИФИКАЦИЯ, СУЩНОСТЬ, ЗНАЧЕНИЕ.
Почва–срда обит многочис мкробов,кот осущ-ют кругврот,N,C,H, S,P,Fe и др.эл-овТкие прцессы повыш плдрдие.В почве мног взбдитлей,длительн хрнятся споры тких взбдтлей как стлбняк,ботулизм,эмкар,злокачественный отек.Больш всго мкробов в чернзмных почвах,в неплодородн–мало.Знач для плдрдия имеет кругврт азота,его осущ-ют микроорг-ы в нсклько процессов.Нач кргврт гниением или аммонификацией.Аммонификация–(гниение) разлож растит-го, живот-го белка.В аэробных услвиях белок рзлгается с образов преимущ-но: NH3,CO2,H2O,сульфатов, нек часть NH3 улетуч-ся и разлаг до молек-го N2 и молек-го Н2,ост часть – усваи-ся бктриями.Гниен в аэробных услов првдят:-Bacillus subtilis–сенная палочка;Bac.mycoides–корневидная бацилла;Bac. мesentericus- картоф-ая плочка;Bac.megaterium–капустная палочка;Proteus vulgaris–вульгарный протей,имеет факультативный тип дых,но тяготеет к аэробным услов;Bac.cereus;E.coli–кишечн плочка.Перечис мкробы имеют нбор протеолитических фрмнтов протеаз и пептидаз, с пмщью кот расщепл белки до полипептидов и олигопептидов.Образов-ся аминокис-ты преобраз-ся дезаминированием,декарбоксилированием,переаминированием,в результ образ-ся NH4 +, СО2 и вода.В анаэробных услов белки также под действ протеаз и пептидаз разруш до аминокислот,кот подверг декарбоксилированию,переаминированию,дезаминированию до NH4 +,СО2,аминов,Н2 S,воды и органических кислот.При гниен блков животн происхожд в анаэробных услов вмест аминов чаще образ диамины или птомаины,ядовитые соед, из кот самый яд-ый кадаверин в совокуп их назыв трупным ядом.Гниен в анаэробных услов проводят:Сl. рutrificum;Cl.sporogenes.Виды гнилостн бктер, так как протеи,E.coli,Bacillus subtilis,Bac.cereus относят к условн–патоген бктриям,способн вызыв гнойно–септические прцссы у ослаблен(переохлаждением,потерей крови,бескормицей)взросл животн и молодняк првых днй жзни.Спсб их проник-ия:через раны,пищевар тракт.Поэт ослабл,новорожд надо защищ от гнилостн бктрий пчвы,примен санитарно–гигиен-е мероп-ия при кормлен,оказании хирургич пмщи.Животные,люди выдел мног мочи,ее сост мочевина,мочевая,гиппуровая кислоты,составные части мочи преобраз-ся мкробми,гиппуровая и мчвая кслты подверг гидролизу.Больше всго в моче–мочевины,ее преобраз уробактерии,они содержа фрмнт уреазу,с помощью кот мчевину подверг гидролизу.СО(NH 2 )+2H2O= (NH4)2CO3 углеаммиачная соль распадается до (NН4)2CO3 →2NH3+CO3+H2O.Уробактерии мгут размнож при рН 9-10,к ним относ Micrococcus ureae,Sporosarcina ureae,в анаэробных услов расщепл мочевину Bac.pasteurii.Мчевна мжет обрзвывться при рспаде аргинина,ее образ и накапл шляпные грибы(шампиньоны), сама мчвина рстниями не усваив.Аммиак,образ-йся при гниен, оч бстро окисляется. 

31. НИТРИФИКАЦИЯ И ДЕНИТРИФИКАЦИЯ.
Процесс окисления аммиака до нитритов и нитратов называют нитрификацией.
Установлено, что первую фазу нитрификации, осуществляют бактерии четырех родов Nitrosomonas, Nitrosocystis, Nitrosolobus, Nitro-sospira.
Вторую фазу нитрификации, проводят бактерии из рода Nitrobacter.
Энергию, образованную за счет окисления кислотных остатков нитрифицирующие бактерии используют для ассимиляции СО2, т.е. все нитрифицирующие бактерии аутотрофы, аэробы, NH3 – субстрат для дыхания.
Образующие азотистая и азотные кислоты усваиваются растениями, но большая часть нитритных и нитратных кислотных остатков превращается в соли с помощью побочных химических реакций, нитриты и нитрата полностью усваиваются растениями, стимулируют урожайность растений, содержание белка, витаминов группы В и т.д.
К гетеротрофные микроорганизмам, способным осуществлять нитрификацию, относят псевдомонады (синегнойная палочка), коринобактерий, нокардии (актиномицеты) и грибы из рода Fusarium,они могут окислять аммиак ,а также амины, амиды.
Усиленная нитрификация приводит к закислению почв. В природе существует обратный процесс.
Процесс восстановления нитратов с выделением N2 или закиси азота N2O называется денитрификацией.
Проходит денитрификация в анаэробных условиях при участии таких бактерий: Pseudomonas denitrificans; Ps.flurescens; Ps.stutreri; Micrococcus denitrificans.
Они в анаэробных условиях имеют нитратное дыхание, т.е. неорганический субстрат окисляется кислородом нитрата.
Процесс денитрификации сдерживает закисление почв, что полезно.
Очень бурно денитрификация идет во влажной почве, от чего потери азотсодержащих веществ. Устраняют денитрификацию культивированием, рыхлением

32. ФИКСАЦИЯ АЗОТА МИКРОБАМИ.
Плодрдие почвы обуслов и звисит от урвня фиксции азота бктриями.Прцесс восст-ия молек-го азта до аммиака назыв азотофиксацией.Их проводят многочис микробы.
N2 + AH2 + ATФ → NH3 +A +AДФ +P-
NH 3 –вступ во взаимодей с кетокислотами бктрий,образ-тся аминокис-ты.Микробы, усваивающ N2, назыв азотфиксаторами.Азотфиксаторы подраздел:1—на
свбднживущие:Asotobacter chroococcum,бктрии из грппы Beiserinckia в честь первооткрывателя Бейринка в 1901г, он выдел Asotobacter сhroococcum,CL.pasteurianum,выделен Виноградским 1893г.,Klibsiella и др.;2—жвущих в смбиозе с рстниями:клубеньковые бктер из рода Rhirobium,они живут в смбиозе с бобвыми.Бктер из рода Azospirillum живут в смбозе со злковыми трвами.Актиномицеты-с кустарн-ми.
Клубень-ые бктер вндряются в млдые корни–влски, прживаясь размнож-ся,образ наросты,внтри кот клуб-ые бктер крупные,грушевидн, сферич или ветвистой фрмы-бактероидные фрмы,актив восстан-щие азот и выдел в сосуд сист рстний аммиак,кот взаимодей с оксикислотами с образов аминокисл.Азотофикс-ры интнсивн обогащ почву азот-ми соединен, вход в сост микробных землеудбрит-ных прпртов.Мкробные змлеудбртльные прпрты
Примен для повыш плдрдия пчвы,повыш уржйнсти.Примен под крмвые бобовые:люцерну, люпин,грх,клвр,обязтльн указ нзван кльтуры.Нитрагином обрабат семена перед псдкой,вначале смач, пот смеш с прпртом.Азотобактерин–содерж Asotobacter chroococcum,примен под ккрузу,тматы,зернов,обрбат семена.Ризоторфин–содерж клуб-ых бктер в торфяной срде,примен под люпин,сою,лцерну,клвр, указыв нзван культры.Фосфобактерин содерж Bac.megaterium var.phosphaticum спсоб разруш фосфоорг-ские соединен и перевод их в доступн для рстний фрму,примен под капусту.Прпрт АМБ компост из торфа,раздроб-го известняка,фосфоритной муки,маточной культур(гнилстнх,расщеп-их цллюлзу бктр, автохтонной мкрфлры)примен в закрыт грунте, для окультуривания почв сврной зоны.Бктр-ые змлеудбртльные прпрты стимулир рост рстний,образов и накопл вита-в,белка.В настоящ врмя в РФ выпуск тольк ризоторфин.

33. МИКРОФЛОРА КОЖИ И ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ.
Постоянные обитатели кожи – стафилококки и стрептококки разных видов, живут в просвете сальных и потовых желез, используя для питания секреты желез. При усиленном сало-, потоотделении вызывают воспаление и образование фурункулов, карбункулов, абсцессов. На кожи присутствуют актиномицеты, плесневые грибы, кишечные бактерии, гнилостные бациллы, они попадают на кожу с пылью, при контакте с почвой, навозом. Много на коже покрытой шерстью, меньше на безволосой. Микроорганизмы на коже уничтожают при выполнении инъекций, операций. Для лечения ран используют антисептические и другие средства АПБ. Эффективность лечения ран зависит от плотности микроорганизмов. Раны инфицированные плохо заживают, а практически без микробные зарастают быстро. За чистотой кожи животных необходимо следить и устранять загрязнения, избыток сала, пота. При выполнении чистой работы, приеме пищи руки моют.
Чистоту рук проверяют посевом смыва на среду Эндо, среду Кесслер, чтобы исключить присутствие БГКП.
По заселению микроорганизмами органы дыхания подразделяют на верхние, средние, нижние дыхательные пути и легкие. В норме микроорганизмы присутствуют в верхних дыхательных путях, на слизистой носа, гортани. Состав микрофлоры непостоянный и соответствует микрофлоре воздуха. Активное размножение подавляется лизоцимом, интерфероном. Средние дыхательные пути - трахея содержат единичные микроорганизмы и только в верхней трети. Нижние дыхательные пути – бронхи стерильные. Легкие стерильные. Если в эти органы попадают микроорганизмы в результате переохлаждения, возникает воспаление: бронхит, пневмония. Для лечения применяют АБП бактерицидного действия. Чаще при простуде активизируется микрофлора слизистой верхних дыхательных путей, возникает воспаление: ринит, ларингит, если не применять АБП бактериостатического действия, то микрофлора распространяется на слизистую трахеи, возникает трахеит, а далее бронхит и пневмония

34. Микрофлора рубца.

Впервые начал изучать в США в 40-х годах 20-го века.в рубце постоянная t и анаэробные условия. Обитает очень много микробов. Большое количество инфузорий.они перемешивают содержимое. 1. Жвачные потребляют много клетчатки ,поэтому в рубце больше всего целлюлозолитических бактерий. Имеют ферменты целлобиаза и целлюлаза, с помощью этих ферментов проводят гидролиз клетчатки. глюкоза окисляется до уксусной, янтарной ,пропионовой и масляной кислоты и всасывается в кровь. 2. Амилолитические бактерии. содержат фермент амилазу , которая так же катал. крахмал с преобразованием его до глюкозы с последующим образованием ЛЖК 3. Усваивающие синтетические азотистые вещ-ва,если в корм добавить мочевины , то могут быть осложнения в виде вздутия , потому что размножаются микробы, усваивающие САВ.4.Глилостные бациллы. они располагают белок корма и образуют углекислый газ, аммиак и водород. Перечисленные газы идут на формирование отрыжки.при кормлении белками и обильном водопое происходит накопление газов, которые могут привести к тимпании, она лечится при помощи
назначения внутрь молочных кислот. если происходит асфиксия, то рубец немедленно прокалывают.5. МЕтаногенные бактерии. Не обязательны. Восстанавливают СО2 до метана, который идет на формирование отрыжки. 6.Расщеплящие липиды корма. к ним относят: пседомонады и пропионовокислые бактерии. образуется ЛЖК.7.Синтезирующие витамины группы В. К ним относят пропионовокислые бактерии. Такие виды как Propioni bacterium acnes и Propioni bacterium bodis. Взрослые КРС не нуждаются в витаминах группы В. Его потребности синтезирует микрофлора рубца. В рубце также идет синтез витамина А, А-продуценты — полезные кишечные палочки E. coli.8.Каротиносинтезирующие бак. Лактобактерии, образуют каротин.9. Молочнокислые бактерии. В рубце обитают Srteptococcus lactis, Lactobacilus acidofilus, бифидобактерии. Они своими метаболитами угнетают гнилостные бациллы, плесневые грибы, образуют ЛЖК,

35. МИКРОФЛОРА КИШЕЧНИКА.
Впервые микрофлору в кишечнике обнаружил Пастер в 1885 г.
По современным данным различают облигатную (обязательную) микрофлору кишечника, факультативную и транзиторную (случайную) микрофлору. Больше всего микробов в толстом отделе кишечника. В тонком отделе сравнительно мало микробов. В фекалиях человека 1/3 от сухой массы составляют микробы. Микробы есть во всех органах пищеварения, кроме печени.
Облигатная микрофлора представлена прежде всего бактероидами, дальше по численности идут бифидобактерии, кишечная палочка E. coli, и мало лактобацилл.
Бактероиды участвуют в расщеплении клетчатки.
Бифидобактерии – главные защитники организма от гнилостных бацилл и возбудителей. Они продуцируют кислоты, которые обеспечивают всасывание макро-, микроэлементов и питательных веществ.Е.коли синтезируют витамин К, участвуют в расщеплении клетчатки.Лактобациллы синтезируют вещества колимицины, которые подавляют гнилостных возбудителей, условнопатогенных, и возбудителей, способствуют всасыванию питательных веществ.К факультативной микрофлоре относят разные виды микроорганизмов, которые не выполняют отрицательное действие. Сюда относят энтерококки, гнилостные бациллы, грибы.Транзиторная микрофлора включает случайную микрофлору, которая может быть представлена возбудителями столбняка, некробактериоза, сальмонеллеза, а у кур — возбудителями токсикоинфекций.

36. МИКРОФЛОРА МОЧЕПОЛОВЫХ ОРГАНОВ, ВЫМЕНИ.
Микробы обитают в сосковом канале, молочной цистерне, молочных протоках (единичные особи). Альвеолы, где идет фильтрация молока из крови – стерильные. Микроорганизмы в сосковый канал попадают с кожи, подстилки, аппарата (Micrococcus luteus, M.flavus, Corynobacterium bovis, Str.lactis). При плохом содержании в молочную цистерну могут внедриться маслянокислые клостридии, гнилостные бациллы, которые будут придавать молоку запах и привкус. Если микроорганизмы проникают в альвеолы, возникает мастит. Катаральный и серозный от Str.agalactia 70 -80% случаев, St.aureus, E.coli, Klebsiella aerogenes, Ps.aeruginosa. Для лечения мастита применяют АБП цистернально и внутримышечно.
Микробный биоценоз органов мочеполовой системы более скудный. Верхние отделы мочевыводящих путей обычно стерильны; в нижних отделах Staphylococcus epidermidis, негемолитические стрептококки, дифтероиды; кантидии. В наружных отделах доминирует Mycobacterium smegmatis. Основной обитатель влагалища – B. vaginale vulgare, является антогонизмом к другим микробам. При физиологическом состоянии мочеполовых путей микрофлора обнаруживается только в их наружных отделах (стрептококки, молочнокислые бактерии). Матка, яичники, семенники, мочевой пузырь в норме стерильны. При гинекологических заболеваниях нормальная микрофлора изменяется. В зависимости от вида животного скорее может меняться кол-во микробных групп, но не видовой их состав.

37. ДИСБАКТЕРИОЗ, ПРОБИОТИКИ, ПРЕБИОТИКИ, СИНБИОТИКИ, СИМБИОТИКИ.
Дисбактериоз — это изменение структуры и количества облигатной микрофлоры с последующей пролифирацией факультативной микрофлоры,проявляется диареей и последствиями. У молодняка наступает в результате поступления большого количества корма, стрессов, у птенцов — яркий свет, переохлаждение, у взрослых — применение антибактериальных препаратов, смена климата, онтогенные заболевания.
Различают 4 формы дисбактериоза кишечника:
Функциональная форма обусловлена потерей облигатной микрофлоры с увеличением количества атипичной E. coli.Диструктивная форма: повреждение слизистой, ворсинок. При дефиците облигатной микрофлоры, увеличивается число микрококков, энтерококков.Токсическая форма характеризуется изменением слизистой и повреждением печени, от недостатка облигатной микрофлоры и расширения спектра и количества факультативной микрофлоры.Септическая форма, когда дефицит облигатной микрофлоры, увеличение факультативной, расширение спектра и появление условнопатогенных энтеробактерий.
Дисбактериозы представляют угрозу жизни молодняка, а для его лечения эффективны препараты, содержащие живых полезных бактерий — пробиотики, пребиотики, синбиотики и симбиотики.
Пробиотики — препараты, содержащие живых полезных бактерий, обитателей кишечника. Первый пробиотик в СССР получен в 1967 г. - сухой ацидофиллин, использовался для разных видов животных и птиц. Ветом содержит рекомбинантный штамм сенной палочки. Руменолакт содержит целлюлозолитические бактерии. Бифинорм содержит бифидобактерии.
Пребиотики — вещества, стимулирующие пролиферацию облигатной микрофлоры. Ветилак (55 % лактулоза).
Синбиотики препараты, содержащие пребиотические бактерии.
Симбиотики содержат несколько видов облигатных микроорганизмов. Препарат СБА.
Современные пробиотические препараты содержат несколько видов полезных бактерий, адсорбенты и пробиотики. Муцинол.

38. Микрофлора воздуха, санитарная оценка.

Воздех не явл. средой пригодной для обитания микро-ов. Она непостоянна. Выживаемость микр-ов зависит от влажности. В сыром возд-хе при +t много возбудителей.Микро-мы попадают в воздух из почвы, с пылью, при испарении, с поверх растений, с выдыхаемым воздухом.На микро-мы губит. действ.: движение воздуха, уфл, фитонцины растений , ионизация.САнитарную оценку возд-ха проводят согласно гигиеническим требованиям безопасности окруж.среды.Санитарно-эпидемические требования ии нормативы. СанПин , определяя микробное число. Определяют микробное число методами: Оседания , когда чашки Петри со средой для выделения МАФанМ оставляют открытыми на 5 минут,затем закрывают , ставят в термостат , через 48 часов подсчитывают количество колоний. Расчет микробного числа проводят по формуле Омелянского: Микроб.число = ( ах 100х1000х5)/(вх10хt) а- кол.выросших колоний. t- время посева . в- площадь чашки Петри. Аспирационный, когда на среду для выделения МАФАнМ делают с помощью аппарата Кротова , а микробное число рассчитывают по формуле : микроб.число= (ах 1000)/V. Где а- количество выросших колоний . V- объем пропущеного через пробор воздуха в литрах.Атмоф. воздух считается чистым ,если микробное число летом не превышает 750, зимой 150 1 в м3.Санитарная оценка воздуха закрытых жилых и производ. помещений. Летом не должно превышать 1500, зимой 2500. Чистым считается меньше 4500 , а загрязненный больше 7000. Допустимые показатели микробного числа воздуха в животноводческих помещениях.Предназначение помещения Микробное число в 1 м3 , норматив Взрослый крупный рогатый скот и молодняк старше 6 месяцев 70000 Родильное отделение для коров 50000 Профилакторий для телят 20000 Свинарник для холостых свиноматок и откорм 100000 Свинарник для хряков-производителей и для подсосных свиноматок с поросятами 50000 Тепляк для окота овец 50000 Конюшня 50000. Для снижения микроб. загрязн. применяют : влажную уборку, непрерыную уборку навоза, проветривание, дезинфекцию, уфл, ионизацию

40.Санитарно-бактериологическая оценка молочной посуды, оборудования

Посуда, доильные аппараты должны быть чистыми, обезжиренными и сухими. Контроль визуальный – бригадир 1 раз в квартал в лаборатории. Они делают смыв стерильным тампоном в 10% физ.р-ра 2-х кратным протиранием площадью 100 см2 поверхности ведер. 4 доильных стаканов, коллектора доильного аппарата и со шлага на всю длину стержня. В лаборатории определяют коли-титр – наличие БГКП в смыве. Для этого делают посев 1 мл. смыва и 1мл разведенного 1:10 в физ.раств. на среду Кода.учет роста чрез 16-18 часов. Санитарное состояние хорошее при отсутствии роста в обоих смывах, санитарное состояние неудовлитвориельное при наличии роста в обоих смывах.

Оценку санитарного состояния птицепомещений проводят после подготовки обьекта к заселению. Для этого делают смывы двукратным протиранием площади 100 см квадратных стерильным тампоном, погруженным в 10 мл физ.раствора, 1мл. смыва сеят на 5 мл. среды Кода, если смыв обесцветился, то проводят повторную отчистку и дезинфекцию.

41.Понятие об инфекции, инфекционном процессе, инфекционной болезни

Инфекция— проникновение микробов в организм с возникновением изменений организма.

Инфекционный процесс — динамика реакции организма на внедрение и распространение микробов.

Если защитных сил организма достаточно, возбудитель исчезает из организма и инфекционный процесс спадает. Инфекционный процесс может быть бессимптомным. Такое явление называют персистенция. Возбудитель в организме не размножается. Часто инфекционный процесс переходит в инфекционную болезнь.

Инфекционная болезнь — выраженная форма инфекционного процесса. Особенности: имеет специфического возбудителя, характеризуется заразностью, имеет определенные периоды развития, невосприимчивы при некоторых заболеваниях  к повторному заражению.

4 периода развития ИБ:Инкубационный — период от проникновения возбудителя в организм до проявления первых признаков (от нескольких часов до 20 лет). Продромальный — период когда появляются признаки общего недомогания: утомляемость, вялость, отсутствие аппетита, повышение температуры тела и др. (от нескольких часов до 4х дней). Период разгара болезни, когда появляются специфические признаки болезни.Гибель животных происходит в этот период. Период выздоровления— восстановление поврежденных функций организма.

Если выздоравливающие продолжают выделять возбудителя, то такое состояние называют острым микробоносительством.Если выделение возбудителя длительное или пожизненное — хроническое микробоносительство.

42. ФОРМЫ ИНФЕКЦИИ.

1. По происхождению инфекция бывает: экзогенная — возбудитель поступил из вне; эндогенная — когда источник — в составе факультутивной, транзиторной (временной) микрофлоры кишечника, в составе недолеченных очагов
2. По локализации в организме инфекция бывает: местная, общая.
3. По распространению в организме инфекция может протекать по типу: бактеремии — кратковременного пребывания возбудителя в крови (от 2 до 6 часов, в этот период клинически высокая температура); септицемии — когда возбудитель размножается в крови, высокая температура, токсикоз; Септицемия возбудителей раневых инфекций клинически называется сепсисом. По типу септикопиемии — когда возбудитель размножается в кровис образованием абцессов. По типу токсемии — когда в организме и в крови циркулируют токсины возбудителя. Токсины хорошо нейтрализуются иммунными сыворотками. По типу вирусемии, когда вирусы циркулируют в крови: высокая температура, токсикоз, изменение давления.
4. По числу возбудителей: моноинфекция (возбудитель один), ассоциативная— когда возбудителей несколько. Сейчас болезни в основном вирусно-бактериальные.
5. По повторности проявления инфекция может быть: вторичная — когда в организм больного внедряется новый возбудитель. Суперинфекция — повторное заражение больного (проникновение возбудителя) до выздоровления. Рецедив — возникновение заболевания без повторного заражения за счёт имеющегося возбудителя. Реинфекция — повторное заражение после переболевнаия тем же возбудителем.

43. ПАТОГЕННОСТЬ, ВИРУЛЕНТНОСТЬ, ФАКТОРЫ ВИРУЛЕНТНОСТИ.
Патогенность — потенциальная способность возбудителя вызывать инфекционное заболевание. Это генотипический полидетерминантный признак, характеризующий видовую особенность возбудителя, но может быть полностью реали-зован в определенных оптимальных условиях.
Патогенность возбудителя в данный момент называют вирулентностью. Вирулентность определяют биопробой с определением DLМ (минимальная смертельная доза) КОЕ (колонии образующих единиц) определить трудно.
Вирулентность обусловлена факторами:
1. Факторы проникновения возбудителя в организм, преодоление им механических барьеров: муцинового слоя, кожи. Проникновение в организм возбудители осуществляют с помощью ферментов, главный из которых гиалуронидаза. Данный фермент разрушает гиалуроновую кислоту межклеточного вещества, ткани становятся проницаемыми для возбудителя
2. Факторы прикрепления. Прикрепление возбудителя к чувствительным клеткам, к слизистым оболочкам называют адгезией. Адгезия на слизистых оболочках сопровождается колонизацией ,размножением возбудителя и распространением по поверхности слизистых оболочек, что сопровождается накоплением большого количества возбудителя. Адгезия — ведущий фактор вирулентности для кишечных палочек, сальмонелл. Если этот фактор нейтрализован, то они перестают быть возбудителями.
3. Факторы подавления защитных сил организма. Подавление защитных сил организма называют агрессией. Реализуется агрессия за счёт структур бактериальной клетки, таких как капсула, мощная клеточная стенка. Агрессию возбудителя поддерживают ферменты протеазы, разрушающие Jg(иммуноглобулины). Агрессию поддерживают лейкоцидины — токсины, которые разрушают лейкоциты.
4. Факторы, оказывающие ядовитое действие на организм. К ним относят белковые токсины: нейротоксины, энтеротоксины, гистотоксины (разрушают ткани), гемолизины, ЛПС-токсины.

44. СПОСОБЫ ЗАРАЖЕНИЯ, ПУТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ПО ОРГАНИЗМУ.

Каждый возбудитель имеет свой способ проникновения и путь распространения в организме восприимчивого животного, выработанный возбудителем в процессе эволюции. Чаще всего возбудитель распространяется по крови — это гематогенный путь, по лимфе — лимфогенный путь, по нервам — неврогенный путь, по слизистым оболочкам органов дыхания, пищеварения, половых, мочевой системы; при соприкосновении пораженных и здоровых тканей.

Заражение может произойти:

1.        Прямым контактом восприимчивого животного с источником инфекции. Это контактный способ заражения. Он имеет разновидности: раневой, половой.

2.        Непрямым контактом, через посредников. Если через корм и воду — алиментарный способ заражения, если через инфицированный воздух — аэрогенный способ заражения, если через укус насекомого — трансмиссивный способ заражения, если через заражённое яйцо — трансовариальный способ заражения, и через предмет ухода.

45. Гуморальные показатели естественной резистентности.

Относят веще-ва плазмы крови, лимфы, тканевой жидкости, секретов слизистых.1Ведущим гуморал. фактором явл комплимент- крупномолекулярный белок, состоит из 20-ти фрак-ций, обл. противомикробным действием. Был открыт Вассерманом в 1908 году. Функция комплимента- мембраноатакующая.Реализует эту функцию фракция С3, проникает внутрь бактериал. клетки создает трансмембранный канал , где проходят вода и электролиты из-за чего происходит растворение клетки.С3 атакует старые эритроциты, также активирует хемотаксис. 2Лизоцим-белок с функцией фермента, атакует фагоциты на стадии прикрепления и окружения , участвует в киллинге микробов в крови . Активизирует процессы регенерации повреждённых тканей. , обр нейрофила , больше всего лизоцима в секрете слизистых. 3.Пропердин - высокомолекулярный белок сыворотки крови, обр под действием антигенного разложения веществами ПС- природы.Обеспечивает крови бактерицидное , гемолитическое и вируснейтрализирующее сво-ва.Большие потери Пропердина возникают при потери крови , после ожогов.4Лейкины- противомикробные вещ-ва против грамм+ бакт. Образуют погибающие нейтрофилы. 5.плакины- противомикроб вещ-ва против грамм + , которые обр погибающие тромбоциты.6.Бетта-Лизины, термостабильные белки , сыворотки крови, против грамм+. 7.Интерфероны- гликопротеиды с разной молекул.массой и биолог.актив. Альфа Интерфероны- секретируют нейтрофилы .обл противовирусным , противомикроб дейст. Бетта-интерфироны- продуц. куринные фибробласты. Гамма- Интерфероны - обр Т-лимфоциты . Уничтожают злокачественные клетки

46.ХАРАКТЕРИСТИКА ФАГОЦИТОЗА.
К клтчнм фктрам относ клтки крви,ткан,учствующ в фгцитозе.Фгцитоз—прцесс зхвта и фрмнтативнго перевар мкробов и др гетерогенных орг-му частиц.Первооткрыват фгцитза И.И.Мечников,кот в 1908 г.был удстоен Нобел прмии.Известн клтки,участв в фгцитозе,обознач как микрофаги и макрофаги.К микроф относ нейтрофилы—клтки крви,образ-ся в кстнм мзге.В прцссе созрев в нейтроф появ гранулы,они содерж фрмент миелопероксидазу,катионные блки,перкись вдрда Н2О2,лактоферин,лизоцим.К макроф относ моноциты и клтки их клана.По свремен днным они формир СМФ(система моно-нуклеарных фагоцитов),к кот относ гистоциты,клтки Куплера,макроф серозных покровов,клтки микро-глии,остеобласты кстнй ткан.Таким образ,костн мзг,крвь,соединит ткнь,лгкие,нрвная ткнь содерж клтки СМФ.Клтки СМФ имеют сходн мех-мы противомикбнго действ, но они не имеют катионных блков и лактоферрина,и содержат гораздо меньше,чем у нейтрофилов,нейропироксидазы.Фгцитз происходит в несколько стадий:1)Хемотаксис–направлен движен к объекту.2)Прикрепл и окружен.3)Рспзнвание.Лучше распозн мкробы,к кот прикрепл антитела Ig(иммуноглобулины)или комплимент С3(его фракция С3).Микробы,окруженные Ig и С3 распоз-ся на 100%.4)Внутриклет поглощ.5) Киллинг(уничтожение)мкрбв происход после дйствия миелопероксидазы,Н2О2,J-,Cl-,Br-;последн повыш активн Н2О2, обрзуются за счёт свбднх радикалов анионов гидроксила ОН-.Выраж пртвмкробное действ–у катионных блков и лактоферрина.Самые активны киллеры–нейтрофилы, пскльку содерж все необход фкторы.Пртивмикроб действ клток СМФ слабее.6)В результ действ пртивмикроб фктров мжет произйти гибль поглощ микрфлры.Тогд наступ следующ 6-я стдия фгцитза–плная деструкция(разрушение)или плное перевар и выталкив-е нежизнспсоб фргмнтов мкробов.Поглщ мкроорг-в и вздейств пртивомкрбных фктрв явл ндостаточн для их инактивации(уничтожения).Тогд деструкции не происход, а микроорг-ы даже мгут рзмножться внутри фгцитов и распрстран по орг-у.Различ фгцтоз звершен, кгда отмеч плную деструкцию(разрушение)микроорг-в,и незаверш, кгда действ пртивомкрбн фктрв ндостаточн,и мкрбы мгут размнож внтри фгцитов и распростр по орг-у.Незаверш фгцтз имеет мсто при нектрх инфекци забол,и его даже подавл,чтбы останов распрстран возбудит по орг-у.Нейтрофилы«работают»в очаге проникн взбдитля в орг-м,а клетки СМФ–в крови,в орг.По соврем днным,главн функц клеток СМФ–разруш тксинв,лекрствн прпртов,избытк холстрна,строидов,прзтов,клток опухлей.У птиц фгцтзм заним-ся псевдоэозинофилы.Важное знач в киллинге мкрбов имеют катионные блки.Миелопероксидазы у птиц нет.

47. ИММУНИТЕТ, ВИДЫ, КАТЕГОРИИ.
Иммунитет – сложная реакция организма, направленная на сохранение постоянства его внутренней среды от всего чужеродного.
Сущность иммунитета заключается в способности организма распознавать, обезвреживать и удалять чужеродные вещества .
Различают несколько видов иммунитета:
⎫Антимикробный (противомикробный) – против бактерий, риккетсий, хламидий, грибов, микоплазм.
⎫Антивирусный (противовирусный).
⎫Антитоксический – против токсинов микробов, ядов змей, растений.
⎫Трансплантационный – проявляется отторжением тканей, органов после пересадки. Его подавляют, применяя иммуносупрессивные препараты (циклосерин, преднизолон, дексометазон).
По происхождению иммунитет подразделяют на категории:
1)Видовой – абсолютная невосприимчивость животных, человека к определенным возбудителям (человек не болеет чумой свиней). Передается по наследству. Обусловлен наличием молекулярно-морфологического барьера( организм не может служить средой обитания для определенных видов микробов).
2)Приобретенный, подразделяется на естественный и искусственный, которые также подразделяются на активный и пассивный.
2.1.Приобретенный естественный активный – формируется после переболевания, поддерживается часто носительством возбудителя, острым или хроническим.
2.2.Приобретенный естественный пассивный – у молодняка за счет Jg матери, сохраняется 1-3 мес.
2.3.Колостральный – за счет Jg матери, поступающих с молозивом или молоком.
2.4.Приобретенный искусственный активный – после введения вакцин. Формируется 7-14 дней, продолжительность – 11 мес., иногда несколько лет.
2.5.Приобретенный искусственный пассивный – после введения иммунных сывороток. Напряженность 10-14 дней.
Сущность иммунитета заключается в образовании специфических белков Jg (иммуноглобулинов), способных нейтрализовать токсины, способствовать удалению возбудителя из организма в ответ на специфическое раздражение, которое называется антигенным.

48. ХАРАКТЕРИСТИКА АНТИГЕНОВ.

Антигены – органической природы генетически чужеродные для организма вещества, которые при введении в организм способны вызывать образование специфических антител (иммуноглобулинов), активизировать клеточные факторы и взаимодействовать с Jg in vitro (в пробирке).

Антигеном может быть вещество: 1)крупномолекулярное; 2)чужеродное; 3)специфическое за счет ЛПС или ПС соединений (ЛПС – липополисахариды, ПС - полисахариды). Именно эти соединения взаимодействуют с детерминантной частью Jg; 4)растворимое; 5)коллоидное.

Хорошие антигены – это белки, связанные с ПС или ЛПС. Хорошие антигены – белковые токсины бактерий, яды змей.

Антигены подразделяют на:

1)        Полноценные, когда против них в организме образуются Jg. Эти же антигены активно взаимодействуют с Jg в пробирках in vitro.

2)        Неполноценные, которые могут только взаимодействовать с Jg in vitro.

3)        Конъюгированные. Их специфичность – за счет присоединенных детерминант с помощью химических связей.

Возбудители содержат антигенные вещества в разных структурах. Если антигены содержатся в жгутиках, их обозначают Н-антигены. Если антигены в капсуле – это К-антигены. Если антигены в цитоплазме или в клеточной стенке – О-антигены.

Среди бактериальных антигенов выделяют протективные антигены (протекция – защита), против которых образуются Jg, активно защищающие организм от возбудителя. Наличие протективных антигенов, их расположение должно быть известно, что необходимо для разработки эффективных вакцин.

49. ХАРАКТЕРИСТИКА АНТИТЕЛ.

Антитела Jg – специфические γ-глобулины сыворотки крови, способные нейтрализовать токсины, активизировать клеточные факторы иммунитета, обеспечивать удаление возбудителя из организма.

Jg, в отличие от нормальных γ-глобулинов, имеет активные центры, комплементарные антигену и взаимодействующие со специфической детерминантой антигенов. Активных центров у специфических γ-глобулинов бывает несколько. Способность активного центра Jg взаимодействовать с антигенными детерминантами называют аффинитетом. Jg молодняка характеризуется слабым аффинитетом. Количество активных центров у Jg называют авидностью.

Jg G циркулируют в сыворотке крови, в тканевой жидкости, нейтрализуют токсины, осаждают антигены, участвуют в аллергических реакциях.

Jg M склеивают, осаждают, растворяют антигены, оказывают противомикробное действие, не участвуют в аллергических реакциях и не проходят через плаценту.

Ig А. Их два вида: Сывороточные Jg A, который циркулирует в крови,нейтрализуют токсины и вирионы, несвязанные с клеткой. Они с кровью поступают в слюну, слезу, бронхиальный секрет, молоко. Секреторные Ig A содержится в муциновом слое слизистых. Они препятствуют прикреплению вирусов и микробов к клеткам, припятствуют проникновению пищевых аллергенов.

Jg D – роль в иммунитете не выяснена, много в сыворотке крови людей, больных аутоиммунными заболеваниями, что имеет важное значение при их диагностике. Защитной функции у Jg D нет.

Jg E – аллергические антитела. В норме они содержатся в незначительных количествах. Высокая концентрация Jg E клинически проявляется анафилактическим шоком, атопическими болезнями (например, бронхиальная астма).

Все Jg термолобильны, чувствительны к рН и активны при нормальной температуре тела.

Моноклональные Ig имеют узкую специфичность. Их продуценты – гибридные клетки. Метод получения моноклональных Jg разработал в 1975 г. Кехлер Мипстейн. Используют моноклональные Jg только для обнаружения возбудителя.

50. ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ. ХАРАКТЕРИСТИКА ОРГАНОВ И КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ.
Иммунная система состоит из органов, клеток и их метаболитов, принимающих участие в развитии иммунитета. Иммунокомпетентные клетки , распределены во всех органах, но концентрируются в определенных.
Различают центральные органы ИС и периферические.
К центральным органам ИС относят:
Костный мозг, где образуются СЛК (стволовый лимфоидные клетки):
Тимус, где СЛК приобретают компетенцию Т-лимфоцитов. Созревание СЛК и трансформация в Т-лимфоциты происходит в эмбриональный период и у молодняка, затем тимус атрофируется.
Сумка Фабрицеуса у птиц и пейеровы бляшки млекопитающих в подслизистом слое толстого кишечника.
Т и В-лимфоциты заселяют лимфоузлы, селезенку, циркулируют в крови и лимфе. Перечисленные органы и ткани относят к периферическим органам ИС. Периферические органы ИС содержат много Т и В-лимфоцитов, где они клонально размножаются в течение всей жизни и выполняют защитные функции.
Вспомогательные клетки иммунной системы (ИС)
ИС включает главные клетки – лимфоциты и вспомогательные клетки. К вспомогательным клеткам ИС относят макрофаги (моноциты), а также дендритные клетки и клетки Лангерганса.
Вспомогательные клетки захватывают антигены и представляют его чужеродность лимфоцитам. Активизируют образование Jg G и Jg E, которые окружают клетки, содержащие антигены. Но главная их функция – распознавать чужеродность антигена и передавать информацию лимфоцитам. Такими свойствами обладают дендритные клетки, имеющие костномозговое происхождение, циркулирующие в крови и постоянно присутствуют в лимфоузлах и селезенке

51. ГЛАВНЫЕ КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ.
Различают 4 основные класса лимфоцитов: Т-клетки (Т-лимфоциты), В-клетки (В-лимфоциты), ЕК (NK – естественные киллеры), 0-лимфоциты (нулевые, не вступающие во взаимодействие). Больше всего в организме Т-лимфоцитов .
По функциональной активности Т-клетки подразделяются на:
Т-хелперы -вступают в контакт со вспомогательными клетками и получают информацию об антигеном раздражении.
Т-киллеры -обнаруживают клетки-мишени, обнаруживают антигены и лизируют их.
Аналогичные функции по обнаружению и уничтожению возбудителей, выполняют ЕК .
Т-киллеры и ЕК могут также уничтожать клетки опухолей. Уничтожение возбудителей происходит под влиянием медиаторов, образованных Т-эффекторами.
Т-супрессоры подавляют Т и В-клетки. Обязательно образуются при снижении концентрации антигена в организме.
ТГЗТ – эти лимфоциты обуславливают повышенную чувствительность организма к возбудителю.
Т памяти – лимфоциты, несущие информацию об антигеном раздражении организма и сохраняющие её длительное вре-мя.
К главным клеткам относятся В-лимфоциты. Название они получили от Фабрицевой сумки . В-лимфоциты занимаются секрецией специфических Jg, могут активизировать плазматические клетки для секреции специфических Jg, могут превращаться в плазматические клетки, чтобы секретировать специфические Jg.
Среди В-клеток формируется популяция В памяти. Образование Jg приводит к нейтрализации токсина, окружению возбудителя с последующим удалением.

52. СТАДИИ ИММУННОГО ОТВЕТА.

Определяют 4 стадии иммунного ответа.

1. Стадия индукции. В этот период возбудитель воспринимается как комплекс различных антигенных веществ и вступает во взаимодействие со вспомогательными клетками. Эта стадия характеризуется высокой активностью вспомогательных клеток.

2. Иммунорегуляторная стадия. Характеризуется высокой активностью Т-хелперов, а также пролиферацией (образованием) и дифференцировкой Т и В-лимфоцитов. Эту стадию регулируют Т-супрессоры.

3. Эффекторная стадия. Активизируются Т-эффекторы, образующие много медиаторов (цитокинов), действующих бактерицидно и бактериостатически. К ним относятся интерфероны, пептиды, тимозин, Т-активин. Образующиеся интерлейкины ИЛ-1, ИЛ-2 способствуют образованию и созреванию Т-киллеров, которые уничтожают клетки-мишени, нагруженные возбудителем. ИЛ-1 и ИЛ-2 активизируют ЕК-клетки (естественные киллеры), В-лимфоциты, а в общей сложности ИЛ-1 и ИЛ-2  активизируют секрецию Jg. Когда иммунный ответ достигает пика, включаются тормозные механизмы, представленные Т-супрессорами. Элиминирование возбудителя прекращает дальнейшее развитие иммунного ответа.

4. Стадия памяти. Происходит накопление Т и В клеток памяти. Они сохраняются на долгие годы и при повторной встрече с антигеном организм реагирует активным формированием иммунного ответа.

53. Естественная резистентность, иммунный статус, иммунодефицитное состояние

 ЕР- способность орга-ма противостоять сапрофитной и условной патогенной микрофлоре . К ним относят: 1.Общефизиологические показатели. 2.Кеточные факторы. 3.Гуморальные факторы. к общефизиологическим показателям ЕР относят : воспалительная реакция , лихорадка. Продолжительное значение имеет умеренный кашель, умеренная рвота . Также к общефизиолог. показат. относят целостность кожи, слизистых, , которые, непроницаемы для д больши-ва возбудит.Эти факторы имеют ограниченное значение , а ведущими явл.клеточный и гуморальные факторы. Иммунный статус- совокупность показателей ЕР и иммунной системы,главный параметр гомеостаза. ИДС-стойкий или временный неадекват.иммунный ответ . ИДС бывают: первичные, вторичные, наследственные. первичные ИДС физиологические у новорождённых, беременных и пожилых. Вторичные при некоторых заболеваниях: потеря белка из-за кровотечения, злокачественные опухоли. Наследственные ИДС: Антигенные, клеточные. фагоцитарные. Иммунокомпетенторы- перепараты, воздейст. на активность иммунокомпетентных клеток. К ним относят : Интерфероны, В-активин, Тимозин, тималин. Вещ-ва угнетающие иммуную систему назыв иммунодепрессанты. Препараты: циклосерин

54. Иммунологическая толерантность.

К ним относят иммунологическую толерантность и аллергические реакции.

Иммунологическая толерантность – отсутствие иммунной реакции на повторное введение антигена.

Толерантность возникает:

1) От применения антигенов, богатых ПС или ЛПС;

2) Толерантность можно создать, применяя иммунодепрессанты, которые используют перед пересадкой органов и тканей;

3) Толерантность может быть врожденной из-за нарушения функциональной особенности Т и В-лимфоцитов, высокой активности Т-супрессоров.

Явление толерантности всегда формируется у животных доноров-продуцентов иммунной системы, поэтому они используются 5-8 циклов, далее их обескровливают

55. АЛЛЕРГИЯ, ТИПЫ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ, СУЩНОСТЬ.
Аллергия – повышенная реакция организма на введение чужеродного.
Вещества, вызывающие аллергию, называют аллергенами. Повышенную чувствительность организма к аллергенам называют сенсибилизацией. Предотвращение и уменьшение сенсибилизации называют десенсибилизацией.
Сильные аллергены – чужеродные для организма белки, гипериммунные сыворотки, многие АБП, особенно полусинтетические и синтетические антибиотики, некоторые витамины, пищевые продукты ,пыльца растений, тополиный пух.
Различают 4 типа аллергических реакций.
Аллергические реакции I типа
К I типу относят аллергические состояния, обусловленные накоплением Jg E, которые взаимодействуют с аллергеном, в результате чего в организме образуется много гистамина, серотанина, протеаз.
К реакция I типа относятся:
1)Анафилаксия – проявляется немедленно или спустя 20-30 минут на парентеральное введение аллергена. Клинически проявляется анафилактическим шоком, отеком Квинке. Анафилаксия может протекать местно в виде отека в месте введения препарата, который распространяется на другие части тела. Такой отек называется отек Квинке. Устраняется применением десенсибилизирующих противоаллергенных средств (супрастин, седуксен).
2)Атопические болезни , относят бронхиальную астму человека и животных, аллергический насморк.
Аллергические реакции II типа
Сущность реакции II типа заключается в образовании и накоплении Jg G и Jg M, которые при участии комплемента активизируют фагоциты, начинающие повреждать клетки организма. Они вызывают цитолиз клеток крови. Реакции II типа проявляются после отторжения трансплантатов (после пересадки органов).
Аллергические реакции III типа
Реакции III типа обусловлены образованием и накоплением циркулирующих иммунных комплексов, фиксирующихся в тканях. В норме цикл образуется, но разрушается фагоцитами и удаляется. Реакции III типа клинически проявляются:
1) сывороточная болезнь, спустя 10-15 дней после введения гипериммунных сывороток с лечебной целью. Появляется отек кожи в месте введения, повышение температура, зуд, припухание суставов.
2) аллергический альвеолит – воспаление альвеол зубов.
3) аутоиммунные заболевания: красная волчанка
4) васкулит – воспаление эндотелия (при чуме собак).
5) гломерулонефриты – цикл накапливается в почечных мембранах, развивается тяжелый нефрит.
6) арахноидиты – воспаление сосудистой оболочки мозга.
7) реакции III типа после пересадки тканей и органов.
Аллергические реакции IV типа
Реакции IV типа опосредованы Т-лимфоцитами. Они возникают через 48 ч после введения аллергена, развиваются из-за высокой активности ТГЗТ. Реакции IV типа называют аллергическими реакциями замедленного типа.
1) С аллергическим фоном, обусловленным быстрой реакцией ТГЗТ, иногда отмечают феномены аллергии – отсутствие аллергической реакции
2) Парааллергии – реакции на экстракт, имеющие антигенное родство с возбудителем. Реакции сопровождаются воспалением в месте введения и повышением общей температуры при подкожном применении.
3) Псевдоаллергии – воспаление в месте введения любого аллергена. Псевдоаллергии вызываются при цистициркозе, эхинококкозе.

56. ВАКЦИНЫ, ХАРАКТЕРИСТИКА.
Вакцины – антигенные препараты для создания активного искусственного иммунитета. Выпускают и используют несколько типов вакцин.
● Живые вакцины – взвеси ослабленных возбудителей. Выпускают жидкие и лиофильно высу-шенные вакцины. Широко применяют для профилактики сибирской язвы ,трихофитии ,рожи свиней ,листериоза , сальмонеллеза свиней .Главное преимущество живых вакцин, они создают напряженный и длительный иммунитет, но могут давать осложнения у ослабленных и инфицированных животных.
●Убитые вакцины (инактивированные) – взвеси вирулентных возбудителей, инактивированные формалином, пропиолактоном, гидроксиломином, этиленимином и сорбированные на адъювантах. Адъюванты – вещества усиливающие и пролонгирующие иммунный ответ. К ним относят: алюмокалиевые квасцы, гидроокись алюминия ,сапонин – экстракт коры мыльного дерева.. Вакцины, содержащие масляный адъювант, называют эмульгированными. Убитые вакцины менее эффективны, чем живые, но они не дают осложнений, поэтому их также широко применяютК убитым вакцинам относят: сплит-вакцины - экстракты поверхностных структур возбудителей, субъединичные вакцины – очищенные экстракты протективных антигенов возбудителей.
● Анатоксины - обезвреженные формалином экзотоксины возбудителей, сорбированные на адъювантах. Применяют для профилактики инфекционных заболеваний, в патогенезе которых важная роль принадлежит токсинам (ботулизм, столбняк и др.) Анатоксины выпускают в форме моно - и ассоциированных
● Поливалентными называют вакцины против разных серогрупп или серовариантов возбудителей ● Ассоциированные вакцины содержат комбинацию антигенов разных возбудителей . Вакцины применяют клинически здоровым животным строго по инструкции: подкожно, внутримышечно, внутрикожно, птице- аэрозольно, выпаивая с водой. Вакцины всех типов после приготовления проверяют по трем показателям:
- стерильность, по отсутствию роста у инактивированных препаратов и чистоте роста у живых;
- безвредность определяют биопробой на лабораторных животных;
- активность (иммуногенность) также определяют биопробой на лабораторных животных, заражая заведомо летальной дозой, 80% вакцинированных должны выжить, контрольные - погибнуть.

58.Антигены и Аллергены, разновидности, применения. Аллергены -экстракты возбуд. или фильтраты бульонных культур, которые применяют для выявления повышенной чувствительности орг-ма к возбудит. Аллергены испол. для диагностики хронических, скрыто протекающих забол: туреркулеза, бруцеллеза , сапа. Выпускают очищенные и нативные аллергены. Очищенные - лиофильно высушенные, не содержащие экстракты возбудит. К ним относят ППД- туберкулин, КАМ- аллерген. Природные: Маллеин, бруцеллин. Аллергены применяют: Внутривенно у больных в месте введения возникают воспаления., у КРС уел.толщ.кожной складки. Закапывая на конъюнктиву. У больных сапом лошадей гнойный конъюнктивит . Взвеси убитых возбудителей. Растворимые- экстракты возбудителей. Эротроциальные- экстракты возбудителей. Сорбированные на формалинизированных эритроцитах барана.

59. РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ И ЕЕ РАЗНОВОДНОСТИ.

Сущность - склеивание антигена с антителами в присутствии электролитов, выпадает осадок. Реакцию агглютинации ставят с целью:  обнаружения антител в сыворотке крови обследуемых, используя заведомо известный антиген, положительно реагирующих считают больными; определения вида, сероварианта возбудителя, используя заведомо известную сыворотку. Реакцию агглютинации ставят двумя способами:         по типу пробирочной в пробирках Флоринского;         по типу капельной на предметном стекле или пластине.

При постановке пробирочной реакции вначале в ряд пробирок наливают физиологический раствор, затем готовят разведения сыворотки, потом вносят антиген. Учет реакции проводят через 18 – 20 часов выдерживания в термостате при  37 С, а затем час при комнатной температуре. Интенсивность агглютинации оценивают в крестах: четыре креста –  100%-ной агглютинации, выпадает осадок в виде зонтика, надосадочная жидкость прозрачная; три креста -80%-ная агглютинация, осадок зонтик, надосадочная жидкость слегка мутная; два креста -50%-ная агглютинация, осадок диск, надосадочная жидкость мутная; отрицательная реакция (-) характеризуется равномерным помутнением.

Контролем реакции агглютинации в пробирках являются отрицательные результаты взаимодействия:

▪ антигена с нормальной сывороткой кролика; ▪ антигена и физиологического раствора.

Капельную реакцию агглютинации ставят на предметном стекле или пластине, смешивая каплю сыворотки и каплю антигена. В положительных случаях, если антиген подходит антителу образуются хлопья: четыре креста– крупные хлопья и прозрачная жидкость; ▪ два креста– мелкие хлопья и мутная жидкость. отрицательная – (-) – равномерная взвесь.

Учитывают капельную РА спустя 5-8 мин после постановки. несколько разновидностей реакции агглютинации.

●        Кольцевая реакция с молоком КРА

●        Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) сущность которой заключается в склеивании эритроцитарного антигена под действием антител и образования осадка в виде зонтика

●        Реакция торможения гемагглютинации (РТГА), широко применяют для выявления гемагглютинирующих вирусов и антител против гемагглютинирующих вирусов.

●        Реакция Кумбса (РК) позволяет выявить неполные антитела

60. РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ И ЕЕ РАЗНОВИДНОСТИ.

Реакция преципитации-осаждение антигена под действием антител. Особенности: высокой чувствительностью и специфичностью;  в реакции используют только растворимый антиген, т.е. экстракт возбудителя в электролите; реакцию ставят с концентрированными сыворотками, определяя вид, вариант возбудителя, а также с растворимым антигеном с целью обнаружения  в исследуемой сыворотке специфических Ig; положительный результат оценивают одним знаком плюс.

Реакцию преципитации ставят по типу:

●Кольцепреципитации в пробирках Уленгута методом наслаивания или подслаивания,  с использованием равных объемов сыворотки и антигена. А. Асколи разработал кольцепреципитацию в 1902 году для выявления антигена возбудителя сибирской язвы в кожевенном сырье, шерсти, патологическом материале. Кольцепреципитацию для определения вида крови, мяса, тканей называют реакцией Уленгута. + кольцепреципитация характеризуется образованием мутного, белого кольца на границе двух жидкостей.

●Флокуляции, когда антиген и сыворотку в пробирке смешивают, в + случаях образуется осадок. Широко применяют реакцию флоккуляции по Кану ( разработана в 1921 г.) в медицине для обнаружения специфических Ig при третичном и четвертичном сифилисе. С помощью флокуляции можно выявить токсин в исследуемом материале и определить активность антитоксических сывороток. Разновидностью флокуляции является реакция нейтрализации.

●Реакция нейтрализации – эффективный тест для определения типа токсина и активности антитоксических сывороток. Ставят в два этапа. Вначале готовят разведения сывороток, затем смешивают равные объемы экстракта токсина и сывороток, выдерживают в термостате 1-2 часа при 370 С. На втором этапе реакции смесь вводят лабораторным животным (, по 2 животного на смесь каждого разведения сыворотки.  Животные, получившие смесь из пробирок, где произошла нейтрализация остаются живыми.

●Реакции диффузной преципитации в агаровом геле (РДП), реакции иммунной диффузии (РИД), когда компоненты реакции антиген, сыворотки вносят в лунки агарового геля, выдерживают в течение 48 – 72 часов при комнатной температуре. Положительный результат – серые полосы между лунками с компонентами. Широко применяют РИД для выявления специфических Ig в сыворотке крови крупного рогатого скота при бруцеллезе и лейкозе.

РДП применяют для изучения антигенной структуры возбудителей.

●Иммуноэлектрофореза – РДП в электрическом поле, применяют для изучения антигенной структуры возбудителей, ставят на пластинах с агаровым гелем. На месте встречи антигенов и антител образуются серые полосы.

61.Реакция связывание комплемента

РСК сложная 2-хфазная реакция взаимодействия антигена, антитела, комплемента с выявлением результата взаимодействия с помощью гемолиза. В первую фазу

взаимодействия антигена, сывороткой обследуемого и комплемента. Если образуется комплекс антиген с антителом, т.о в сыворотке обследуемых  есть

специфические Ig с комплексом связывается комплемент  весь или частично. Если в сыворотке нет спец. Ig то комплемент остается свободным.. во вторую

фазу добавляют эритроциты барана и гемолитическую сыворотку. Учет в крестах: 4 креста – нет гемолиза. 100% комплемента связано, эритроциты на дне.

3 креста – 80% комплемента связано. Эритроциты на дне, надосадочная жидкость слабо розовая. 2 креста – 50% комплемента связано. Эритроциты на дне и

красная жидкость. Отрица.результат – полный гемолиз. РСК ставят в пробирках Флоринского. РСК ставят с целью: 1) обнаружение специфических Ig в сыворотке

крови обследуемых, используя заведомо известный антиген. 2) определение серотипа  и варианта вируса. Если вторую фазу РСК +10 в течении 10-12 ч.  

То реакцию называют РДСК. Она более чувствительна чем РСК

62.        Иммуноферментный анализ (ИФА)

ИФА высокочувствительный метод выявления комплекса антиген с антителом по разложению субстрата, по образованию окрашивания или по увеличению плотности раствора. ИФА применяют:

1) для обнаружения антигена в исследуемом материале, антител у исследуемых 2) ставят в 2-х вариантах: а) гистохимический (иммуннопероксидазной реакцией) для выявления возбудител в мазках, гистосредах, используя прямой или непрямой методы  2) твердофазный ( реакции энзимагенных антител)- для выявления возбудителя, лунки обработаны гипериммунной сывороткой; для выявления Ig – лунки обработаны антигеном. Ифа ставят в 3 этапа: 1) вз-е антигена с антителом 30 мин 37 градусов с последующим пятикратным промыванием и высушением. 2) вносят конъюгат – это антивидовой глобулин, меченный ферментом. В кач-ве фермента – пероксидаза или щелочная фосфатаза, 45 мин 37 градусов с последующим промыванием и осушением 3) добавляют субстрат (вещество, разлагающееся под действием фермента, образующее окрашивание или изменение плотности раствора). Субстраты: ОВД – ортофенилдиамин, 5-аминосалициловая кислота, НФФ- нитрофенилфосфат, ТМБ – тетрометилбензедин. ОВД, 5-аминосалициловую кислоту и ТМБ применяют для выявления пероксидазы, а НФФ – щелочной фосфатазы. Если происходит образование комплекса, то он фиксируется к стенкам лунок и обязательно взаимодействует с конъюгатом, абсорбируя фермент. При добавлении субстрата происходит его разложение под действием фермента, который проявляется появлением окрашивания жёлто-коричневого (ОВД, 5-аминосалициловой кислоты и НФФ), голубого (ТМБ) цветов. Повышение плотности раствора устанавливает спектрофотометр. Появление окрашивания раствора в лунках и увеличение плотности раствора – «+» реакция. Если комплекса не образуется, то конъюгат не фиксируется, смывается, субстрат не разлагается, увеличение плотности не происходит, раствор не окрашивается.

63. Реакция иммунофлуоресценции (РИФ, МФА)
Основу РИф составляет явление люминесценции – поглощения световой энергии с последующим выявлением в виде светового излучения. В РИФ люминесценция проявляется в виде флуоресценции – свечения веществ флуорохромов (ФИТЦ, родомин). Для возбуждения флуоресценции используется УФЛ или сине-фиолетовое свечение люминесцентных микроскопов. Метод РИФ заключается в том, что антитела, соединенные с флуорохромом вступают в специфическую связь с гомологичным антигеном и образует комплекс, обнаруживающийся по характерному свечению. Методика РИФ: 1. Приготовление мазков 2. Подсушивание при комнатной температуре 3. Фиксация ацетоном 15 мин при температуре -15 градусов 4. Окрашивание (возд. С флуорес. Сывороткой по прямому и непрямому методам 30 мин.) 5. Учет интенсивности свечения в крестах. # - очень яркое свечение, +++ - зелёное свечение, ++ - слабо свечение, - - тёмное свечение.

64. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Экспресс-метод для обнаружения и определения вида возбудителя. Разработан Мюллисом в 1983 году. Основу метода составили выделения ДНК из исследуемого материала – денатурация; получение миллионных копий ДНК с использованием фермента ДНК-полимеразы 68-72 градуса 30 секунд – полимеризация (элонгация). Денатурацию, полимеризацию проводят в пробирках Элиндорфа. Сравнение выделенной ДНК с ДНК-образцами (праймерами). Учёт результатов проводят электрофорезом в 1-2% геле в присутствии бромистого этидия до образования светящихся полос. Метод ПЦР применяют: 1 для обнаружения возбудителя, 2 ДНК-идентификации личностей человека, 3 выявления генов наследственных болезней.

64. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Экспресс-метод для обнаружения и определения вида возбудителя. Разработан Мюллисом в 1983 году. Основу метода составили выделения ДНК из исследуемого материала – денатурация; получение миллионных копий ДНК с использованием фермента ДНК-полимеразы 68-72 градуса 30 секунд – полимеризация (элонгация). Денатурацию, полимеризацию проводят в пробирках Элиндорфа. Сравнение выделенной ДНК с ДНК-образцами (праймерами). Учёт результатов проводят электрофорезом в 1-2% геле в присутствии бромистого этидия до образования светящихся полос. Метод ПЦР применяют: 1 для обнаружения возбудителя, 2 ДНК-идентификации личностей человека, 3 выявления генов наследственных болезней.