Тіршіліктің пайда болуы теориялар:биохимиялық теориялар

2 ТӘЖІРИБЕЛІК ЖӘНЕ ЗЕРТХАНАЛЫҚ ЗЕРТТЕУЛЕРДІҢ ӘДІСТЕРІ  МЕН ТӘСІЛДЕРІ

2.1 Зерттеу әдістері мен тәсілдері

          Микробалдырлардың тазарту әсерін зерттеу объектілері болып Chlorella vulgaris Z-1, Chlorella vulgaris C-1 және C-2 коллекциялық штамдары қызмет етті . Chlorella vulgaris Z-1 штаммы Сорбұлақ (Қазақстан, Алматы облысы) жинақтауышының ластанған су қоймасынан бөлініп алынып, әртүрлі ластанған ортада автоселекцияға ұшырады. Chlorella vulgaris C-1 және C-2 бақылау штамдары Биликоль көлінен бөлініп алынды. (Қазақстан, Жамбыл облысы).Микробалдырларды алдын ала 04,Тамия қоректік орталарында, күндізгі жарық шамдарымен (4000 люкс) және 250С температурада 250-1000 мл көлемді конустық колбаларда  өсірілді. Зерттеулерде "Саймасай" (Қазақстан, Алматы облысы) балық шаруашылығының ағынды суы пайдаланылды, ол ондағы орган-минералды заттардың жоғары болуымен, Тамия ортасымен, сондай-ақ тоған толтыру үшін пайдаланылатын ұңғымалардан алынған сумен сипатталады. Микробалдырлардың ластанған суда өсу қабілетін анықтау үшін штаммдар зертханалық жағдайларда балық шаруашылығының ағынды суында сол жағдайларда өсірілді. Әрбір 24 сағаттан кейін Горяев камерасындағы жасушалар санын есептеу арқылы дақылдың өсуі анықталды [20]. Суды гидрохимиялық талдау стандартты әдістемелер бойынша жүргізілді[21]. 

          Хлорофилл концентрациясы USB 2000(Ocean Optics, Inc., АҚШ) портативті спектрометріне негізделген спектрофотометрдегі ацетон сығындыларындағы тікелей спектрофотометриялық әдіспен анықталды.

          Хлорофилл флуоресценциясының жарық қисық параметрлерін тіркеуді Water-PAM (Walz, Effelrich, Германия) флуориметрінде жүргізді. Жарық тәуелділіктері қарқындылығын 0-ден 1600 мкЕ/м2с-қа дейін ретімен ұлғайған кезде өлшенді. Жарықтандырудың әрбір сеансының соңында қанық жарқылды (0,8 с, 3000 мкЕ/м2с) қолдану арқылы FM параметрлері мен флуоресценцияның F(t) жарыққа шығуы тіркелді. Флуоресценцияның өлшенген деңгейлерінің негізінде келесі параметрлерді есептеді: FV/FМ = (FM – FO)/FM - II (ФС II) фотосистемадағы зарядтарды бөлудің ең жоғары кванттық шығысы; Yield = (FM' – Ft) / FM' - Фс II-дегі ең  тиімді кванттық шығыс. 

             Циклді  емес
электрондардың  тасымалдануы  салыстырмалы  жылдамдығы  мына формула бойынша анықталды [15-17]:

                                         ETR = Yield х Ei х 0,5

мұнда Ei-жарықтандыру, (мкЕ/м2с). Алынған жарық қисықтарының негізінде ETR келесі фотосинтетикалық параметрлерді бағалады: жарық энергиясын максималды пайдаға асыру коэффициенті (қисық, α көлбеу бұрышы) және көлік тізбегінің электрон бойынша электрондардың максималды салыстыр малы жылдамдығы (ETRmax). α   Р/Е қисық сызығының , ETRmax  қисық сызықты аймағында орналасқан нүктелерден түзілген сызықтық регрессия коэффициенті –жарық қанық аймақта  ETR мәндерінің орташа мәні ретінде есептелінді.Фотосинтетикалық параметрлердің анықтамалары жалпы қабылданған номенклатураға сәйкес келеді [15].

          Хлорофиллдің индукциялық қисық флуоресценциясының параметрлері aquapen-C 100 (Photon System Instruments, Чехия) импульстік портативті флуориметрде тіркелді. Өлшеу алдында үлгілерді  қараңғыда 20 минут бойы ұстады.Флуоресценсиялық индукция жоғары уақытпен 0,05мс бастап тіркелді.Хлорофилл индукциялық флуоресценция  қисықтары интенсивтілігі 3000 мкЕ/м2с.  болатын көгілдір жарықпен (λ = 650 нм)  қарқындылықта көрінді.

Индукциялық қисық параметрлерінің негізінде Фотосинтездің бастапқы процестерінің сипаттамаларын сандық талдау үшін JIP-тест қолданылды. Бұл тест флуоресценцияның кинетикалық қисық индукциясының мынадай параметрлерін қолданады: Жарық ұзақтығы 50 мкс (FO), 2 мс (FJ), 30 мс (FI), 6 с (F6s), сондай–ақ FM (флуоресценцияның ең жоғары қарқындылығы) және M0 (а хлорофиллінің салыстырмалы ауыспалы флуоресценциясының бастапқы еңістігінің мс-1 орташаланған шамасы). Бұл шамалар келесі параметрлерді есептеу үшін пайдаланды:[pic 1]