Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в пищевых продуктах

Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в пищевых продуктах

Определение количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в 1 г (1 см3) продукта (общее микробное число):

ГОСТ 10444.15-94 Продукты пищевые.

Методы определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. ГОСТ 26670-91 Продукты пищевые. Методы культивирования микроорганизмов. ГОСТ Р 50396.1-92 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Метод определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. а) Метод посева в агаризованные питательные среды. Продукт (или смыв) либо его разведения высевают в агаризованные питательные среды и после инкубирования посевов подсчитывают все выросшие видимые колонии.

Метод предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта более 150 или в 1 см3 жидкого продукта более 15 КОЕ мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (МАФАнМ). По 1 см3 продукта (или смыва) и (или) каждого выбранного для посева разведения вносят в две параллельные стерильные чашки Петри, после чего их заливают (не позднее, чем через 15 мин) расплавленным и остуженным до 45(±1)°С питательным агаром (15-20 см3), который тщательно круговыми движениями перемешивают. Высота слоя питательной среды должна составлять 4-5 мм.

Среде дают застыть на строго горизонтальной поверхности. Если ожидают ползучий рост микроорганизмов из родов Bacillus или Proteus, то посевы после застывания среды заливают вторым слоем питательной среды или голодного агара (приблизительно 4 см3). Засеянные чашки с застывшей средой переворачивают. Посевы выращивают в течение 72(±3)ч при температуре 30(±1)°С в аэробных условиях. Затем подсчитывают число выросших на чашках Петри колоний.

Для подсчета отбирают те чашки, на которых выросло от 15 до 300 колоний. По результатам подсчета колоний вычисляют среднее арифметическое значение числа колоний из всех посевов одного разведения. Результаты подсчета колоний пересчитывают на 1 г (см3) продукта по формуле: M= NC/m, где М — количество микроорганизмов в 1 г (см3) продукта; N — степень разведения навески; m — количество инокулята, внесенное для посева в чашку Петри; С — округленное среднеарифметическое значение числа колоний. При анализе смывов количество микроорганизмов на 1 см2 поверхности продукта вычисляют по формуле: X = a*10n*(V/(S*V1)) где а — среднее арифметическое количество колоний в посевах; n — число десятикратных разведений; V—объем жидкости, взятый для приготовления смыва (см3); V1 — объем инокулята, внесенного в чашку Петри (см3); S — общая площадь анализируемой поверхности (см2). Конечный результат вычисления выражают числом от 1,0 до 9,9x10n. При анализе консервов, при необходимости, указывают результаты дополнительных испытаний по определению морфологии выделенных микроорганизмов. В отдельных случаях для приблизительного подсчета можно использовать чашки, на которых выросло менее 15 колоний. Доверительные интервалы для таких случаев указаны в таблице 5.6. В тех случаях, когда число колоний в параллельных посевах не соответствует требованиям, предъявляемым для достоверного подсчета, результат можно выразить так, как представлено в таблице 5.7. б)

Метод наиболее вероятного числа. Продукт и (или) его разведения высевают в жидкую питательную среду и после инкубирования посевов учитывают видимые признаки роста микроорганизмов. При необходимости подтверждения роста микроорганизмов культуральную жидкость пересевают на агаризованные питательные среды. Количество микроорганизмов подсчитывают при помощи таблиц наиболее вероятного числа (НВЧ). Метод предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта менее 150 или в 1 см3 жидкого продукта менее 15 КОЕ МАФАнМ. Для посева берут три последовательные навески продукта и (или) его разведения, отличающиеся по количеству высеваемого продукта в 10 раз. Каждую навеску продукта и (или) его разведения высевают в трехкратной повторности в пробирки (или колбы) с одной из жидких питательных сред (глюкозотриптозный бульон, мясо(рыбо)пептонный бульон, мясо(рыбо)пептонный бульон с глюкозой, мясо(рыбо)пептонный бульон с глюкозой и дрожжевым экстрактом).