Определение количества эритроцитов в крови

Определение количества эритроцитов в крови

Эритроциты, или красные кровяные тельца, составляют основную массу клеток крови. Количество их у каждого вида животных относительно постоянное, но оно может изменяться в зависимости от возраста, пола, продуктивности, физиологического состояния и других условий

Для работы необходимы: пробы крови разных видов животных, смеситель для эритроцитов, счетная камера Горяева, покровные стекла, пробирки, микроскоп, лоток, груша, спирт, эфир, 0,9 % или 2 % раствор NaCl, вата, марля.

Ход работы:

1. Разведение крови

Перед началом работы необходимо ознакомиться с устройством меланжера (смесителя) (рис. 1). Меланжер для подсчета эритроцитов представляет собой капилляр с ампулообразным расширением и с бусинкой красного цвета. На меланжер нанесены три метки: 0,5, 1,0, 101. Кровь набирают до метки 0,5, а затем добавляют физиологический раствор до метки 101, чем достигают разведения в 200 раз. При заборе крови и ее разведении, во избежание нарушения точности анализа, нельзя допускать попадания в меланжер пузырьков воздуха. Покачиванием смесителя, отверстия которого зажимают между пальцами, кровь тщательно перемешивают для равномерного распределения эритроцитов.

2. Заполнение счетной камеры

Счетная камера (рис. 2) состоит из толстого прямоугольной формы стекла с двумя сетками Горяева, нанесенными на средние площадки камеры.

[pic 1]

Рис. 1 – Меланжеры для форменных элементов крови:

1 – меланжер для эритроцитов, 2 – меланжер для лейкоцитов

Снаружи от желобов, образующих букву «Н», находятся две прямоугольные пластинки, к которым притирается шлифованное покровное стекло. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов, 25 из которых разделены поперечными и продольными полосами на 16 малых. Сторона малого квадрата составляет 1\20 мм, площадь – 1\400 мм2, глубина камеры – 1\10 мм, следовательно объем камеры над малым квадратом равен 1\4000 мм3.

[pic 2]

[pic 3]

Рис. 2 – Счетная камера Горяева: А – вид сверху, Б – вид сбоку

Перед заполнением камеры ее и покровное стекло промывают водой, протирают ватным тампоном, смоченным эфиром или спиртом, а затем сухой полотняной салфеткой. Затем притирают покровное стекло к боковым поверхностям камеры скользящими и давящими движениями больших пальцев обеих рук до появления радужных колец. Перед заполнением камеры выпускают на ватный тампон 2-3 капли содержимого из капилляра, затем заполняют камеру, нанося капли разведенной крови на среднюю пластину у края покровного стекла. В силу капиллярности жидкость равномерно распределяется под сеткой. После заполнения камеру оставляют на одну минуту для равномерного распределения и оседания эритроцитов.