Белоктар

          Семей Медицина Университеті[pic 1][pic 2][pic 3][pic 4]

Биохимия және химиялық пәндер кафедрасы

[pic 5]

СӨЖ

Өткізу формасы: эссе

Пәні:Медициналық биохимия

Тақырыбы:«Белоктар»

 Орындаған: Казбекова А.С

204-топ Ж.М.

Тексерген: Смаилова Ж.К

                                                     Семей 2018жыл

                                               Белоктар

ЖОСПАР:

І. Кіріспе

ІІ. Негізгі бөлім:

1. Биохимиядағы қолданылатын әдістер.Белоктарды бөліп алу және тазарту әдістері.
2. Хромотофографиялық және электрофоретикалық әдістер(таңдамалы қондыру,гель-фильтрация,электрофорез,ионо)

ІІІ. Қорытынды.

ІV.Пайдаланылған әдебиеттер тізімі.

Нәруыздарды азарту және бөліп алу әдістері

Биологиялық материалдан(ұлпа,мүше,жасушалық органеллалардан)жеке нәруздарды алу белгілі бір сатыдлы операцияларды жүргізуді талапи етеді .

Олардың қатарына :

• Биологиялық материалды ұнтаұтау және жасуша мембранасын бұзу ;
• Қандай да бір нәруывздары бар органеллалаларды  фракцияларға бқл ;
• Нәруыздарды экстракциялау (еріген күйге көшіру)
•  Нәруыздар қоспасынан жекеленген нәруыздарды бөлу.

Ұлпаларды ұнтақтау  және нәруыздарды экстракциялау

Биологиялық материалдарды  ұнтақтап,бұзу үшін  қолданылатын әдістер:ұлпаларды гомогендеу,бір  мұздатып, бір еріту және жасушаларды ультрадыбыс арқылы өңдеу.

Биологиялық материалды гомогендеу

Белгілі бір  рН-тың мәні және концентрациясы бар буферліек ерітіндБиологиялық материалды гомогендеу

Белгілі бір  рН-тың мәні және концентрациясы бар буферлік ерітінді қосылған ұлпаны гомогенизаторға салады .Гомогенизаторда ұлпа майдаланып және өте ұсақ бөлшектерге айналады.

Ұлпаларды мұздату және еріту әдістері

Ұлпаларды бір мұздатып бір жібітіп отыру кезінде түзілген мұз кристалары жасуша мембранасын бұзады .Құрылымы бұзылған ұлпалардың ерімейтін  бөлімін центрифугалау арқылы тұнбаға түсіреді.Гомогенатты әрі қарай,әр түрлі жылдамдықта  центрифугалау арқылы тұнбаға түсіреді.Гомогенатты әрі қарай ,әр түрлі  жыламдықта центрифугалау  жасуша ядролары, митохондрийлері және т.б. оргенеллалар ы бар фракцияларға бөлінеді және  жасуша цитозолінің  еритін нәруыздары  бар тұнба  үстілік  сұйықтық түзіледі.

Зеттеуге алған нәруыз, осы фракциялардың бірінде болады .

Нәрыздарды  тазарту әдістері

Жеке нәруыздарды алудың ең қиын  кезеңі- белгілі  бір  ұлпалардан  алынған  ерітіндідегі нәруыздарды бір-бірінен ажырату.Көбінесе,зерттеуге алынатын  нәруыз ерітіндідегі  барлық  нәруыздардың  проценттік үлесін алатын  аздаған мөлшерде кездеседі.

Нәруыздың конформациялық  өзгергіштігі жоғарғы болғандықтан, нәруыздардға денатурациялаушы  әсерлерден сақ болу керек,және оларды бөлу,тазартуларды төменгі температурада жүргізу қажет.

Нәруыздарды тазалаудың алғашқыкезеңдерінде,белгілі бір нәруыздар өзіне тән қасиетін ескеретін  тазарту әдістерін қолдану қажет,мысалы температураға тұрақтылығы немесе қышқыл ерітіндідегі тұрақтылығы  сияқты .Алғашқы кезеңдегі әдістер арқылы физика-химиялық қасиеттерімен  айрықша  ерекше болып келетін қажетсіз нәруыздардан тазарту қажет.Сонан соң,нәруыздарды тазартудың сезімтал әдістерін қолданады.

Талғамды денатурациялау арқылы  нәруыздарды тазарту

Көптеген нәруыздарды денатурациялайды  және олар қысқа мерзімді 50-70С қыздыру кезінде немесе рН-тың  5 мәнінде  қышқылданған ерітіндіде  тұнбаға түсді .Егер зерттеуге алған нәруыз мұндай  жағдайда тұнбаға түспесе, талғамды денатурациялау арқылы  бөгде нәруыздардың  біраз бөлімінен  денатурациялау  арқылы тұнбаға  түсіріп алынған  тұнбаны сүзу немесе  центрифугалау арқылы  тұндырып бөліп алуға болады.