Оценка пригодности эндогенного кортизола для мониторинга напряженности стресса в рамках исследований с модуляцией стресс-реакций у карп

Реферат

 Березина Д.И, Фомина. Л.Л. Использование эндогенного кортизола при диагностике напряженности гормониндуцированного стресса у карпа (cyrpinus carpio) // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Р. Филиппова. 2021. № 4(65). С. 40–46.

Введение. Выращивание рыбы в условиях интенсивной аквакультуры сопряжено с постоянным влиянием на нее ряда повреждающих факторов внешней среды (стресс-факторов). Первичной реакцией на воздействие стрессора у рыб являются эндокринные изменения, включающие, прежде всего, выработку катехоламинов и глюкокортикоидов. Они вызывают вторичные метаболические, осмотические и другие изменения. Регулируется кортикальный ответ у костистых рыб гипоталамо-гипофизарно-интерренальной (HPI) осью.

В исследованиях стресса часто бывает трудно определить степень реакции в результате влияния различных стрессфакторов, и интерпретация этого влияния, как правило, производится по повышению уровня эндогенного кортизола. В других исследованиях в качестве главных либо дополнительных стресс-маркеров используется уровень катехоламинов, концентрация глюкозы и хлоридов. Искусственное увеличение концентрации кортизола крови и, тем самым, индукция стресс-реакций могут быть осуществлены путем введения экзогенного кортизола перорально, путем внутрибрюшинных  и внутримышечных инъекций , а также внедрением масляных имплантов. Может возникнуть закономерный вопрос о том, является ли уровень эндогенного кортизола наиболее подходящим параметром для измерения уровня стресса в рамках таких исследований.

Целью данной работы авторы определил оценку пригодности эндогенного кортизола для мониторинга напряженности стресса в рамках исследований с модуляцией стресс-реакций у карпов.

В качестве материала и методик исследований составители научной работы воспользовались проведением эксперимента с гормональным индуцированием стресс-реакций, который проводился на 24 карпах Cyprinus carpio L., которых предварительно разделили на три группы : рыбы с имитацией острого стресса (первая экспериментальная группа), рыбы с имитацией хронического стресса (вторая экспериментальная группа) и контрольные животные.

Рыб содержали в экспериментальной установке, обеспечивающей непрерывную циркуляцию воды между аквариумами с аэрацией и температурой воды 18– 20°С, режим кормления 1 раз в сутки. Отбор проб крови проводился сразу же после 24-часовой акклиматизации и далее через 7, 14 и 21 сутки после инъекции препаратами. Перед отбором проб рыб анестезировали при помощи добавления в воду гвоздичного масла в дозе 0,033 мл/л с последующей выдержкой в ней 15 минут. Отбор проб проводился пункцией хвостовой вены, после чего осуществляли индивидуальное мечение рыб.

Количественный анализ кортизола сыворотки определяли методом твердофазного хемилюминесцентного иммуноанализа при участии ООО Центр лабораторной диагностики «Целди».

Значения полученных результатов в работе представлены в виде средней величины и стандартной ошибки средней (M±m). Достоверность различий показателей для множественных независимых выборок определяли с помощью критерия Кроскелла-Уоллеса, для парных зависимых выборок использовали критерий Вилкоксона. Результаты исследования со значением вероятности допущения альфаошибки, равные либо менее 5% (р < 0,05), расценивались как статистически значимые. Различие двух показателей считали достоверным, если оно равнялось или превышало свою среднюю ошибку разности в два и более раз.

В результате проведенного исследования Д.И. Березиной и Фоминой Л.Л., было отмечено, что 43 уровень кортизола плазмы у рыб, не получавших инъекцию гормонов, претерпел плавное снижение к 14-м суткам и дальнейшее восстановление концентрации к 21-м суткам эксперимента, а его разброс составил 335-376 нг/мл за все время. У рыб, стрессированных дексаметазоном, содержание эндогенного кортизола изменялось скачкообразно и разнонаправленно, дважды резко снизившись на 7-е и 21-е сутки эксперимента и составив 246-346 нг/мл в ходе исследования. Вероятно, 80-100% блокирование синтеза кортизола дексаметазоном у рыб проявляется в период 24-96 часов, вызывая последующие колебания. В группе рыб, подвергнувшихся инъекции гормона пролонгированного действия (бетаметазона), произошло полное ингибирование выработки эндогенного кортизола к 7-м суткам эксперимента с 353 до 5 нг/мл, не восстановившееся к концу опыта, что связано с постепенным высвобождением действующего вещества из депо. В обоих случаях происходят колебания в гормональном составе крови исследованных рыб, отличные от контроля. Дополнительный стрессовый эффект инъекции у экспериментальных животных в данном случае авторы исключили, поскольку инъецирование препаратов проходило сразу после первичного взятия крови у всех групп рыб, в связи с чем воздействие хэндлингстресса было одинаково.