Методы окраски микроорганизмов. Виды бактериологических красителей

Реферат

По дисциплине

«Микробиология»

Тема: «Методы окраски микроорганизмов. Виды бактериологических красителей»

Выполнил: студент 2 курса 3 группы

Факультета Ветеринарно-биологоческого

Мачулин Семён Александрович

Научный руководитель:

к.б.н., доцент Денисенко Т. Е.

Работа проверена:

«___» ____________________________

Оценка _________________________________

Преподаватель: __________________________

2021 г.

Оглавление

Введение        3

Бактериологические красители        3

Состав бактериологических красителей        4

Методы окрашивания препаратов        5

Прижизненная окраска        5

Окраска фиксированных препаратов        6

1.Приготовление мазка        6

2.Высушивание мазка        6

3.Фиксация мазка        7

4.Окрашивание        7

5.Высушивание        8

Заключение        8

Список литературы        9

Введение 

Окраской микроорганизмов называют комплекс методов и приёмов, которые используют для обнаружения и идентификации бактерий при помощи микроскопа. Окрашивание позволяет судить о форме, размере, расположении клеток относительно друг друга, в то время как на неокрашенных препаратах это сделать сложнее из-за их низкой контрастности. Используя различные красители и методы их применения можно не только повысить чёткость препарата, но и выделить отдельные структуры микроорганизмов, например спор, ядра, клеточной стенки. Окраска микроорганизмов представляет собой физико-химический процесс соединения компонентов клетки с краской. Способность микроорганизмов вступать в реакцию с красителями, в следствии чего окрашиваться, называют тинкториальными свойствами. Окраску производят как живых (витальная окраска), так и убитых микроорганизмов, фиксированных на предметном стекле.

  Бактериологические красители

В микробиологии используют различные красители. Классификаций бактериологических красителей так же существует несколько: по кислотным свойства и по тому, на какой основе готовился краситель.

По кислотным свойствам бактериологические красители делятся на кислотные и основные. У основных красителей ионом, придающим бактериальной клетке окраску, служит катион, у кислых - анион, а структуры бактерий, взаимодействующие с красителем, преимущественно отрицательно заряжены и поэтому лучше воспринимают основные красители.

К основным красителям относятся: нейтральный красный, пиронин, сафранин основной фуксин (дают красную окраску); генциан фиолетовый, кристаллический фиолетовый гематоксилин, тионин (дают фиолетовую окраску); метиленовый (даёт синюю окраску); малахитовый зеленый, метиленовый зеленый, янус зеленый (дают зелёную окраску).

К кислотным: кислый фуксин, эозин, эритрозин, гропеолин (эти красители дают розовый или красный цвет).

Большинство применяемых красителей поступают в лаборатории в сухом порошкообразном или кристаллическом виде, после чего из них готовят насыщенные спиртовые, спиртоводные или водные растворы.

Состав бактериологических красителей

Спиртовые растворы используются для длительного хранения. Порошки красок в определенном для каждого красителя количестве всыпают во флаконы, заливают 96%-ным этиловым спиртом, после чего готовый раствор сначала выдерживают в термостате для лучшего растворения веществ, затем фильтруют через бумажные фильтры, чтобы избавиться от не растворившихся микрочастиц, которые при окраске препаратов оседают на клетках, тем самым затрудняя их изучение под микроскопом. Таким методом готовят насыщенный спиртовой раствор метиленового синего, насыщенный спиртовой раствор основного фуксина.