Получение высокоактивных антител против антибиотиков

ПОЛУЧЕНИЕ ВЫСОКОАКТИВНЫХ АНТИТЕЛ ПРОТИВ АНТИБИОТИКОВ

УДК……………………….

Джангулова А., докторант 1 курса

Жагипар Ф.,

Зарина, магистрант 1 курса

Казахский агротехнический университет им.С.Сейфуллина

В настоящее время в ветеринарной практике используется широкий спектр противомикробных веществ в качестве терапевтических и/или профилактических препаратов. Кроме того, отдельные из них, в частности антибиотики, применяются как стимуляторы роста. Для повышения эффективности откорма рекомендовано добавление в корма антибиотиков в малых дозах. Однако несоблюдение правил применения антибиотиков может привести к образованию остаточного количества препаратов в продуктах животноводства, которые при употреблении в пищу могут вызывать различные побочные эффекты [1].

Длительное использование в пищу продуктов, содержащих препараты антибиотиков, может способствовать и появлению антибиотикорезистентности. Поэтому, качественный и количественный анализ антибиотиков необходим для обеспечения безопасности пищевых продуктов и борьбы с незаконным и чрезмерным использованием ветеринарных препаратов. Острота проблемы вынуждает отдельные страны выступать за сокращение использования антибиотиков и разработку новых альтернативных средств, чтобы минимизировать вред, причиняемый остатками лекарственных веществ [2].

Согласно положениям технического регламента Таможенного союза ТР ТС 021/2011 не переработанное продовольственное (пищевое) сырье животного происхождения должно быть получено от здоровых продуктивных животных только по истечении сроков выведения из организма лекарственных средств для ветеринарного применения, в том числе антибиотиков. При этом переработчик, получив информацию от поставщика об их применении, может проверить поступающее сырье на наличие остатков этих антибиотиков. В ТР ТС 021/2011 и ТР ТС 034/2013, а также в СанПиН 2.3.2.2871-11 установлены максимально допустимые уровни для 56 антибиотиков, значения которых согласуются с требованиями регламентов ЕС. При этом в России нормативы содержания тетрациклинов в пищевых продуктах сохранены на более жестком уровне (≤ 0,01 мг/кг во всех нормируемых продуктах), чем нормативы в стандартах Комиссии Кодекс Алиментариус (от ≤0,1 до ≤1,2 мг/кг в зависимости от продукта) и ЕC (от ≤0,1 до ≤0,6 мг/кг) [3].

Традиционные методы обнаружения антибиотиков в пищевых продуктах включают микробиологические методы, которые не обладают достаточной чувствительностью, специфичностью и точностью. Более того, они являются трудоемкими, длительными по выполнению и требуют обученных специалистов-бактериологов. При этом полученные результаты носят качественный или полуколичественный характер, а их достоверность в значительной степени зависит от стабильности и физиолого-биохимических характеристик тест-штаммов микроорганизмов [4]. Инструментальные аналитические методы, включая ВЭЖХ, характеризуются высокой точностью, специфичностью и чувствительностью, и используются как эталонные методы Эти сложные и дорогостоящие исследования с привлечением высококвалифицированного персонала выполняются лишь в отдельных специализированных лабораториях, и не могут быть использованы для мониторинга безопасности продукции животноводства.  

В настоящее время для выявления антибактериальных препаратов в продуктах питания взамен инструментальным технологиям все большее распространение получают ИФА. В США и Японии данная иммунологическая реакция уже является основным скрининговым тестом для определения предельно-допустимого количества (ПДК) антибиотиков в продуктах питания. ИФА, как быстрый и высокочувствительный метод, характеризующийся высокой воспроизводимостью, рекомендован директивой ЕС 2002/657 для определения остаточных количеств ветеринарных препаратов в продуктах животноводства [5]. Однако, оснащенность лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы на продовольственных рынках РК и стран Содружества не позволяют проводить анализы мяса и молока на остаточные количества антибиотиков с применением ИФА. В этой связи, весьма важно вести исследования по разработке других альтернативных методов, которые, не уступая ИФА по своей чувствительности,  позволяли бы  в течение 5-10 мин. оценить результатов  полевом режиме без использования дополнительного оборудования или портативных устройств. Среди них особое внимание заслуживает процедуры, основанные на иммунохроматографическом анализе (ИХА). В мировой литературе можно найти ряд исследований по разработке различных вариантов ИХА для детекции антибиотиков в пищевых продуктах [6]. Главным реагентом ИХА-теста является антитела, имеющие строгую специфичность к определенным антибиотикам. Получение антител против антибиотиков, которые являются гаптенами – дело непростое.