Оценка протеазной активности трипсина по диффузии электроактивной метки

ОЦЕНКА ПРОТЕАЗНОЙ АКТИВНОСТИ ТРИПСИНА ПО ДИФФУЗИИ ЭЛЕКТРОАКТИВНОЙ МЕТКИ.

1 слайд. Для задач конструирования биоэлектрохимических устройств большой интерес представляет исследование электрохимического поведения окислительно-восстановительных медиаторов в среде гидрогелей.

В последнее время довольно много работ проводится на стыке наук: химия, физика, биология. В электрохимии работают с обычными растворами, электролитами. Однако методики нуждаются в адаптации к биологии и тематикам, необходимым для развития биологических и медицинских исследований.

2 слайд Целью работы стала разработка модельного биосенсора для оценки протеазной активности

Задачи:

1. Оценить электрохимическое поведение толуидинового синего как потенциальной электрохимической метки
2. Исследовать диффузию электроактивной метки в среде желатинового гидрогеля разной концентрации
3. Исследовать влияние трипсина на электрохимическое поведение толуидинового синего в среде желатинового гидрогеля

3 слайд Материалы и методы исследования

Для достижения наших целей мы должны :

• Исследовать поведение ТС.
• Изучить поведение ТС в среде желатинового гидрогеля.
• Исследовать поведение ТС в среде 3 % желатинового гидрогеля, полученного методом поперечных сшивок глутаровым альдегидом с различной концентрацией.
• Ознакомиться с диффузией желатинового гидрогеля различной концентрации.
• Рассмотреть диффузию 3% желатинового гидрогеля с трипсином
• Изучить влияние трипсина на диффузию ТС в желатиновом гидрогеле непосредственно на электроде.

4 слайд 

Границы цикла  от -700мВ до 700мВ. В интервале 700мВ до 0 мВ происходит заряжение двойного слоя, но не происходит электрохимических превращений красителя, поэтому значение тока очень малы. При достижении потенциала значения от 0 мВ до -330 мВ. то происходит скачек силы тока, который соответствует процессу электровосстановления толуидинового синего. Этот пик означает, что все молекулы, которые находятся на поверхности электрода, все подверглись восстановлению. После этого пошел спад восстановления, т.е. все молекулы, которые могли восстановиться - восстановились. Затем цикл пошел в обратном направлении. При достижении потенциала от -370 мВ до 300,4 мВ происходит уменьшение силы тока. Данный пик соответствует процессу окисление. После чего происходит спад окисления, а затем заряжение двойного слоя.