Допуск на спектрофотометр

Допуск на спектрофотометр

Принцип работы

Методы спектрометрии предполагают анализ спектрального состава разных биологических материалов с помощью отраженного или прошедшего через них электромагнитного излучения в оптическом диапазоне по их способности отражать (поглощать) различные длин волн. Для этого проводится сравнение двух фотопотоков оптического излучения: падающего на образец и прошедшего или отраженного от/через образец.

Эффективность данного анализа состоит в том, что все вещества по-разному поглощают свет при разной длине волны. По количеству поглощенного света можно установить концентрацию вещества, изучить состав его элементов. Анализ можно проводить в количественном и в качественном аспектах.

План работы прибора:

1. Источник света излучает свет через монохроматор.

2. Монохроматор разделяет свет на различные длины волн.

3. Определенная длина волны проходит через образец в кювете.

4. Детектор регистрирует интенсивность света после прохождения через образец.

5. Полученные данные обрабатываются компьютером с использованием специального программного обеспечения.

На выходе получается спектр поглощения или пропускания, который представляет собой график интенсивности света относительно длины волны. Этот спектр может быть использован для анализа концентрации вещества в образце.

Закон Бугера-Ламберта-Бера:

оптическая плотность раствора прямопропорцианальна концентрации светопоглощающего вещества, толщине слоя раствора и молярному коэффициенту светопоглощения.

[pic 1]

Монохроматор - это прибор, который позволяет разделять свет на его составляющие цвета и выбирать только один из них, создавая монохроматический (одноцветный) луч света.

Примером монохроматора может быть призма, которая разлагает белый свет на спектр цветов. Когда свет проходит через призму, он изгибается в различных углах в зависимости от его цвета. Это позволяет отделить разные цвета и пропустить только выбранный цвет света.

Другим примером монохроматора является спектрограф, используемый в спектрофотометрии. Этот прибор пропускает свет через узкую щель, а затем через призму или сетку, которая разлагает свет на спектр. Затем с помощью детектора измеряется интенсивность света в зависимости от его длины волны.

Спектрофотометры необходимы для следующих измерений:

- установления концентрации материалов;

- определения в растворах оптической плотности и скорости ее изменения;

- распознавания неизвестных веществ, для измерения чистоты материалов (присутствия примесей);

- изучения химического строения и состава веществ, химических реактивов, различных образцов;

- оценки цвета;

- спектрального анализа в научных исследованиях, в астрономии, физике, биологии.

1. Как устроен спектрофотометр?

Прибор состоит из:

• источника света в виде разного вида ламп – вольфрамовых (видимый и инфракрасный спектр), дейтериевых (УФ-диапазон), комбинации галогено-дейтериевых (ультрафиолетовый и инфракрасный);
• монохроматора – призм, дифракционных решеток для выделения узких участков спектра оптического излучения;
• преломляющих, отражающих, дифракционных оптических элементов – для направления светового потока (стекла, призмы, зеркала, световоды);
• отделение или кювета для размещения исследуемого вещества, твердого или жидкого;
• фотоприемника – для фиксации уровня светового излучения, который проходит через исследуемый образец;
• усилителя сигналов – для передачи сигналов после определенного преобразования для обработки на компьютер.

[pic 2]

1. Как работать с кюветами?

Общие правила:

• используемые для измерений кюветы, имеющие одинаковую рабочую длину, должны иметь одинаковое пропускание при заполнении одним раствором;

• рабочие поверхности кювет должны перед каждым измерением тщательно протираться спиртоэфирной смесью;

• при установке кювет в кюветодержатель нельзя касаться пальцами рабочих участков поверхностей (ниже уровня жидкости в кювете);