Moderna - мРНК вакцина от Covid-19

Доклад про модерну.

Moderna – мРНК вакцина. В середине мая 2020 года Moderna сообщала о первичных положительных результатах по разработке вакцины против COVID-19 MRNA-1273 (у испытуемых обнаружена выработка антител к вирусу), и о подготовке клинических испытаний.

В ноябре Moderna выпустила заявление об эффективности её вакцины от COVID-19 на 94,5 %.

25 ноября 2020 года Европейская комиссия сообщила, что одобрила контракт с фармацевтической компанией Moderna.

В 2021 году эксперты Всемирного конгресса вакцин признали препарат от Moderna лучшей в мире вакциной от коронавируса. Препарат от Moderna также одержал победу в категории «Лучшая новая технология/платформа вакцины». Тем не менее принцип, по которому происходил отбор, эксперты конгресса не уточнили.

Преимущества мРНК: не инфицирует, не требует доставки через ядерную мембрану, быстро разлагается в клетке. Точное копирование строения АГ. Возможность создать более иммуногенную конформацию. Доставка нескольких мРНК – мультибелковые комплексы. мРНК также выступает как самоадъювант.

Минус: мРНК может узнаваться и убиваться до доставки в клетку, поэтому используют доставку в липидных мембранах.

Алгоритм создания мРНК вакцин типичен (3 слайд), что позволяет создавать их достаточно быстро. Именно из-за того, что можно создать мРНК вакцину достаточно быстро, эту технологию применили в создании вакцины от коронавируса.

Синтез мРНК вакцины.

In vitro, плазмидная ДНК, РНК полимераза, нуклеозид трифосфаты и буфер. Также на 5’ конец добавляется инвертированный трифосфат. Далее мРНК очищается хроматографией или affinity purification.

Итоговая мРНК состоит из нетранслируемого региона 5’ (5’-UTR), ORF – open reading frame, 3’-UTR и полиаденилатный хвост, похожий на внутреннюю РНК клетки.

• UTR нужны для регуляции (связываются с белками, связывающими РНК) – с 3 конца отвечает за период полураспада мРНК, с 5 – стабильность и эффективность инициации трансляции.
• ORF – оптимизирующий кодоны участок. Он влияет на скорость считывания и на конформацию вторичной структуры.
• Полиаденилатный хвост повышает экспрессию белка.

После внутримышечного введения.

мРНК в ЛНЧ (липидные наночастицы) – в антиген-презентирующие клетки, в т.ч. дендритные (6 слайд). Доставка в эти конкретные клетки неслучайна, эффект связан со строением ЛНЧ.  Далее мРНК активирует АГ-рецепторы на эндосомах клетки, в то же время идет синтез белка, который кодирует мРНК. АГ вовлекается в реакцию с В и Т клетками, также активируется врожденный иммунитет.

Врожденный иммунитет реагирует на чужеродную мРНК (на липиды ЛНЧ не реагирует, в этом смысл). Активируются PRR (pattern recognition receptors), TLR3, TLR 7/8, цитозольные рецепторы MDA5, RIG1 – PAMPs. Значение активации интерферонового пути двоякое: с одной стороны, вырабатывается устойчивый В и Т- клеточный иммунитет. С другой, угнетается синтез белка.

Для того, чтобы синтез белка не угнетался мРНК модифицируют, добавляя N1-метил-псевдоуридин. Это «обманывает» ТЛР7/8.

Также на формирование долгосрочного иммунитета хорошо влияет кинетика – то, что белок не появляется весь сразу, а синтезируется постепенно. Это ведет к более высоким титрам АТ и ответу Т-клеток и В-клеток, а также фолликулярных Т-хелперов. (5 слайд)